免疫磁珠吸附法：突破抗CD47单抗干扰的输血前检测新策略

针对抗CD47单抗(mAbs)在输血相容性检测中引发的假阳性干扰问题，研究人员开发了两种新型免疫磁珠(IMB-OVCAR3和IMB-CD47)，通过吸附血浆中的抗CD47单抗，30秒内即可消除干扰且不影响不规则抗体筛查。该成果为肿瘤免疫治疗患者的输血安全提供了高效解决方案，具有重要临床应用价值。

　　

随着肿瘤免疫治疗的快速发展，靶向CD47（一种广泛表达的免疫检查点分子）的单克隆抗体(mAbs)在临床应用中展现出巨大潜力。然而这类药物存在一个棘手问题——它们会与红细胞(RBCs)表面的CD47结合，导致输血前检测出现假阳性结果，严重干扰临床输血安全。传统方法如二硫苏糖醇处理对CD47无效，而Gamma-clone抗IgG法仅适用于IgG4亚型抗体，现有解决方案存在耗时长、成本高或适用范围有限等缺陷。

为解决这一难题，空军军医大学唐都医院的研究团队创新性地开发了两种功能化免疫磁珠(IMBs)：IMB-OVCAR3（包被高表达CD47的卵巢癌细胞OVCAR3裂解蛋白）和IMB-CD47（包被重组CD47蛋白）。通过流式细胞术验证，OVCAR3细胞的CD47表达量显著高于红细胞和血小板。研究采用羧基化磁珠共价偶联技术，结合透射电镜表征显示磁珠分散性良好。在模拟样本（添加magrolimab）和临床样本（接受lemzoparlimab治疗的骨髓增生异常综合征患者血浆）中，两种IMBs仅需30秒混合即可完全消除4+强度的干扰，效果与Gamma-clone法相当。流式分析证实IMBs通过吸附游离抗CD47 mAb降低RBCs的FITC荧光信号，最佳用量为100μL。特别值得注意的是，IMBs对包括抗D、抗K、抗Fy^b
等在内的不规则抗体筛查无影响，且在4℃保存3周后仍保持吸附活性。该成果发表于《Pathology》杂志。

关键技术方法包括：1）基于流式细胞术和免疫荧光染色筛选CD47高表达细胞系；2）磁珠蛋白偶联与透射电镜表征；3）凝胶柱间接抗球蛋白试验(IAT)评估干扰消除效果；4）建立含6种不规则抗体的模拟验证体系；5）使用临床患者样本（n=3）进行实效验证。

研究结果显示：
3.1 实验原理与IMBs表征
透射电镜显示两种IMBs在保存液中分散良好，流式检测证实OVCAR3细胞的CD47表达量是红细胞的3.2倍，为高效吸附奠定基础。

3.2 IMBs消除抗CD47 mAb干扰
在200 ng/mL magrolimab干扰样本中，30秒处理即可使凝集强度从4+降至阴性，临床样本（最高637 ng/mL lemzoparlimab）同样获得完全清除。

3.3 流式验证吸附机制
荧光强度随IMBs用量增加呈梯度下降，150μL IMBs可使RBCs荧光恢复至基线水平，证实剂量依赖性吸附。

3.4 不规则抗体筛查不受影响
处理后的含抗D（1+）样本保持原凝集强度，证明IMBs特异性吸附抗CD47 mAb而不影响其他抗体。

3.5 保存稳定性
21天保存后IMBs仍能完全清除临床样本的3+干扰，满足实验室常规使用需求。

讨论部分指出，相较于现有技术，该策略具有三大优势：一是适用性广，可中和不同结构的CD47靶向药物；二是操作快捷，较传统15分钟吸附法效率提升30倍；三是成本可控，IMB-OVCAR3的细胞裂解蛋白制备成本仅为重组蛋白的1/5。虽然目前样本量有限，但为ALX148、SRF231等更多CD47抑制剂的干扰消除提供了普适性解决方案。

这项研究首次将磁珠吸附技术应用于输血医学领域的药物干扰清除，不仅解决了抗CD47治疗的临床输血困境，其"靶向吸附-快速分离"的设计思路也为其他单抗药物（如抗CD38、抗CD20等）的干扰消除提供了新范式，对推动精准医疗时代的输血安全具有里程碑意义。