顺铂对比培美曲塞更显著增强恶性胸膜间皮瘤PD-L1表达：细胞与异种移植模型揭示的时序动态

恶性胸膜间皮瘤（MPM）免疫治疗响应率有限，化疗如何调控PD-L1表达以优化免疫检查点抑制剂（ICI）联用策略尚存争议。昆明医科大学团队通过体外细胞实验（H226/MSTO-211H）和体内异种移植模型，首次系统比较顺铂（CDDP）与培美曲塞（PEM）对PD-L1的时序调控差异。研究发现CDDP在48小时诱导PD-L1上调幅度显著高于PEM（P<0.05），且双相型亚型（MSTO-211H）响应更显著，为化疗-免疫联合治疗时序选择提供关键实验依据。

　　

恶性胸膜间皮瘤（MPM）被称为"石棉癌"，是一种侵袭性强、预后极差的罕见肿瘤。尽管免疫检查点抑制剂（Immune Checkpoint Inhibitors, ICI）如纳武利尤单抗（nivolumab）和伊匹木单抗（ipilimumab）在临床试验中展现出生存获益，但客观缓解率不足50%，且PD-L1表达水平与疗效的关系存在争议。更令人困惑的是，临床常用的化疗方案——顺铂（Cisplatin, CDDP）联合培美曲塞（Pemetrexed, PEM）——可能通过未知机制影响肿瘤免疫微环境。既往研究甚至得出矛盾结论：有报道称长春瑞滨可显著上调MPM细胞PD-L1，而另一些研究显示CDDP/PEM处理后的外周血单个核细胞（PBMCs）共培养体系中免疫检查点分子表达反而下调。这种"化疗-免疫调控悖论"直接关系到临床联合治疗策略的优化，但缺乏系统性研究。

昆明医科大学的研究团队在《Pathology - Research and Practice》发表的研究，首次通过多维度实验设计破解这一难题。研究采用两种具有临床代表性的MPM细胞系：上皮型H226和双相型MSTO-211H，结合异种移植模型，运用流式细胞术检测凋亡、Western blot分析PD-L1蛋白表达、免疫组化评估肿瘤组织PD-L1动态变化。

细胞培养
实验选用中国科学院细胞库提供的H226和MSTO-211H细胞系，在含10%胎牛血清（FBS）的RPMI 1640培养基中培养，严格控制培养条件为37°C、5% CO₂
。

化疗干预后MPM肿瘤细胞凋亡检测
流式数据显示，CDDP和PEM均能显著诱导细胞凋亡（CDDP>PEM, P<0.05），且呈现时间依赖性。未处理组的H226和MSTO-211H细胞凋亡率基线分别为6.24-7.55%和3.30-5.31%，而48小时CDDP处理组凋亡率分别提升至34.2%和28.7%。

PD-L1表达动态变化
Western blot揭示MSTO-211H细胞基线PD-L1表达显著高于H226（P<0.05）。化疗干预后，两种细胞PD-L1均上调，但CDDP诱导效应更强（48小时表达量达PEM组的1.8倍）。异种移植实验进一步验证：MSTO-211H肿瘤生长更快且PD-L1基础表达更高，CDDP处理组在肿瘤进展期PD-L1上调幅度达270%，显著高于PEM组的150%。

讨论
该研究首次阐明CDDP通过时序依赖性方式强力上调MPM细胞PD-L1，这种效应在双相型亚型中尤为显著。这一发现解释了临床观察中化疗-免疫联合疗法的异质性响应：CDDP可能通过诱导"免疫原性细胞死亡"（Immunogenic Cell Death, ICD）和DNA损伤反应协同激活PD-L1通路，而PEM的代谢抑制作用可能弱化此效应。研究创新性提出"化疗免疫调控窗口期"概念——CDDP给药后48小时可能是联合ICI的最佳时机。

研究意义

1. 为MPM个体化治疗提供分子标志：双相型亚型患者可能更受益于CDDP-ICI序贯治疗
2. 揭示化疗药物特异性免疫调控机制，推翻"化疗均质化影响免疫检查点"的传统认知
3. 建立PD-L1动态监测模型，指导联合治疗时机选择

该研究由国家自然科学基金（8236070060）和云南省科技厅-昆明医科大学联合专项（202401AY070001-247）资助，所有动物实验均通过昆明医科大学动物伦理委员会审批（KMMU20220931）。作者声明无利益冲突，通讯作者Zhenghua Zhang（张正华）与Yang Tian（田阳）、Dan Han（韩丹）共同主导实验设计。