中国稗草中CdCYP71FL1基因赋予的甲基苯磺隆代谢抗性机制研究

【字体: 时间:2025年06月16日 来源:Pesticide Biochemistry and Physiology 4.2

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  为解决稗草(Cyperus difformis)对ALS抑制剂类除草剂的代谢抗性问题,研究人员通过RNA-Seq和异源表达技术,发现CdCYP71FL1基因通过降解甲基苯磺隆(BSM)介导多除草剂抗性。该研究为抗性杂草治理提供了新靶点,对农业可持续发展具有重要意义。

  

在直接播种水稻田里,稗草(Cyperus difformis)如同"绿色幽灵"般困扰着中国农民。这种莎草科杂草不仅与水稻争夺养分,更因长期使用乙酰乳酸合成酶(ALS)抑制剂类除草剂而进化出令人头疼的抗药性。甲基苯磺隆(bensulfuron-methyl, BSM)作为常用ALS抑制剂,其失效直接威胁粮食安全。以往研究发现,湖南HN-8稗草种群同时存在靶标位点Pro-197-Leu突变和神秘的代谢抗性机制,但后者如同黑箱般未被破解。

广西农业科学院的研究团队决心揭开这个谜团。他们发现抗性种群中6个细胞色素P450单加氧酶(CYPs)、5个ATP结合盒转运蛋白(ABCs)、1个UDP-葡萄糖醛酸转移酶(UGT)和1个谷胱甘肽S-转移酶(GST)显著高表达。其中CdCYP71FL1基因尤为特殊——它能在BSM诱导下特异性激活。当把这个基因转入拟南芥后,神奇的事情发生了:转基因植株不仅抵抗BSM,还对双草醚(bispyribac?sodium)和灭草松(bentazone)产生交叉抗性。酵母实验更直接捕捉到CdCYP71FL1降解BSM的瞬间。这些发现发表在《Pesticide Biochemistry and Physiology》上,为杂草抗性治理投下一枚"生物标记弹"。

研究采用三大关键技术:通过RNA-Seq比较抗性(HN-8)与敏感(HN-S)种群转录组差异;利用实时定量PCR(qPCR)验证候选基因;采用拟南芥异源表达系统和酵母表达系统进行功能验证。样本来自中国湖南的抗性种群和广西的敏感种群。

【BSM-metabolizing gene selection through RNA-Seq】
转录组分析揭示抗性种群中53,402个转录本差异,25,574个unigenes中CdCYP71FL1、CdCYP74B57和CdCYP94C180等CYPs家族基因显著上调,N50>2000 bp的优质数据为后续研究奠定基础。

【Metabolic resistance of C. difformis to BSM】
代谢酶网络分析显示,CYPs主导除草剂第一阶段代谢,ABCs负责跨膜转运,而UGTs和GSTs参与共轭反应。CdCYP71FL1的异源表达证实其可代谢多种除草剂,这种"一专多能"特性使其成为代谢抗性的核心枢纽。

该研究首次阐明CdCYP71FL1介导的多除草剂代谢抗性机制,相比传统靶标突变抗性(TSR),这种非靶标抗性(NTSR)更具环境适应性。研究建议将CYPs抑制剂与ALS抑制剂联用,为抗性治理提供新思路。正如作者所言:"面对杂草的进化智慧,我们需要更精准的‘分子除草剂’设计策略。"这项发现不仅对保障中国粮食安全具有重要意义,更为全球抗性杂草治理提供了经典案例。

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