奎纳克林通过Dlg5/AKT通路诱导自噬抑制骨肉瘤细胞增殖及通过Dlg5/Girdin通路抑制迁移侵袭的研究

本研究针对骨肉瘤(OS)治疗中转移复发患者预后差的难题，探索了植物源性化合物奎纳克林(QC)通过调控Dlg5/AKT自噬通路和Dlg5/Girdin迁移通路双重机制抑制OS恶性进展的作用。研究发现QC可显著阻滞细胞周期于G2/M期，通过上调Dlg5抑制AKT磷酸化诱导自噬，并调控Girdin信号抑制转移，动物实验证实其显著抑制肿瘤生长且无器官毒性，为OS靶向治疗提供了新型候选药物。

　　

骨肉瘤(OS)作为青少年高发的恶性骨肿瘤，尽管手术联合化疗使五年生存率提升至60-70%，但转移复发患者预后仍极差，亟需新型治疗策略。奎纳克林(QC)作为金鸡纳树皮提取的抗疟老药，近年被发现具有广谱抗癌活性，但其在OS中的作用机制尚未阐明。厦门市医学健康指导项目等资助的研究团队通过系统研究，揭示了QC通过双重分子通路抑制OS恶性进展的创新机制。

研究采用CCK-8法检测细胞活性、RNA测序分析通路变化、流式细胞术分析细胞周期、Transwell实验评估迁移侵袭能力，并建立小鼠移植瘤模型验证体内效果。人类OS细胞系143B和MG63及骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为实验对象。

QC抑制OS细胞活性
实验显示QC对BMSCs无毒性，但对OS细胞的抑制作用强于阿霉素(DOX)，8μM浓度即可显著抑制细胞活性。Calcein-AM/PI双染证实QC诱导OS细胞死亡而非正常细胞。

QC阻滞细胞周期于G2/M期
流式细胞术揭示QC处理导致OS细胞G2/M期比例显著增加，伴随周期调控蛋白Cyclin B1和CDK1表达下降，表明通过干扰有丝分裂进程抑制增殖。

RNA测序揭示Dlg5/AKT自噬通路
转录组分析发现QC显著上调Dlg5表达，抑制AKT磷酸化，激活自噬标志物LC3-II积累。敲除Dlg5可逆转QC的抑癌作用，证实Dlg5是QC调控自噬的关键介质。

Dlg5/Girdin通路抑制迁移侵袭
Transwell实验显示QC处理使OS细胞迁移侵袭能力下降50%以上，免疫印迹证实QC通过Dlg5下调Girdin蛋白表达，破坏细胞骨架重组，该效应可被Dlg5 siRNA逆转。

体内实验验证抗肿瘤效果
小鼠移植瘤模型显示QC治疗组肿瘤体积减少65%，病理检查未见心肝肾毒性，与临床常用化疗药相比安全性更优。

该研究首次阐明QC通过双重分子机制对抗OS：一方面通过Dlg5/AKT轴诱导自噬性死亡，另一方面通过Dlg5/Girdin轴抑制转移。这种多靶点作用特性使其有望克服传统化疗耐药问题。特别值得注意的是，QC对正常细胞毒性低且成本低廉，具有显著的临床转化优势。研究不仅为OS治疗提供了新型候选药物，还为开发靶向Dlg5的联合治疗方案提供了理论依据，对改善青少年恶性肿瘤预后具有重要社会意义。论文发表于《Phytomedicine》期刊。