肠道菌群特征与高甲基化结直肠癌（HMCC）的关联机制及临床意义研究

这篇研究通过16S rRNA测序和qPCR技术，揭示了高甲基化结直肠癌（HMCC）患者肠道菌群的独特特征，发现84种细菌丰度显著差异，其中具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum）与HMCC的DNA甲基化状态、错配修复缺陷（dMMR）及BRAF突变密切相关。研究为理解菌群通过表观遗传（如CpG岛甲基化表型CIMP）驱动CRC的机制提供了新视角，并为靶向干预提供了潜在方向。

　　

背景

结直肠癌（CRC）是全球第三大高发癌症，其发病率与表观遗传改变（如DNA甲基化）及肠道菌群紊乱密切相关。高甲基化CRC（HMCC）是CRC的一种特殊亚型，以CpG位点广泛甲基化为特征，与近端肿瘤位置、低分化组织学和BRAF突变等不良预后因素相关。尽管菌群在CRC中的作用已被广泛研究，但其与DNA甲基化的关联机制仍不明确。

患者与方法

研究纳入86例散发性CRC患者和63名健康对照，采集粪便和肿瘤组织样本。通过改良MethyLight法分析16个CpG位点的甲基化状态，定义HMCC（≥8个位点甲基化）和低甲基化CRC（LMCC）。采用16S rRNA基因测序解析菌群组成，并通过qPCR定量肿瘤组织中具核梭杆菌（F. nucleatum）的载量。此外，通过免疫组化评估错配修复（MMR）蛋白表达，PCR-rSSO检测RAS/BRAF突变状态。

结果

临床特征：21例（24.4%）患者被归类为HMCC，其与近端肿瘤（p=0.04）、大直径（p<0.01）、低分化（p<0.01）及dMMR（p=0.03）显著相关。
菌群分析：HMCC组中84种细菌丰度显著改变，包括F. nucleatum（p<0.01）和普雷沃菌（Prevotella stercorea）等。α/β多样性无组间差异，但F. nucleatum在粪便与肿瘤组织中的载量显著正相关（ρ=?0.45），且在dMMR和淋巴转移组中富集（p<0.05）。
多因素分析：肿瘤较小（p=0.0026）和Alistipes putredinis丰度（p=0.0110）是HMCC的独立预测因子。

讨论

F. nucleatum可能通过上调DNA甲基转移酶促进HMCC发生，但其作为“始作俑者”还是“旁观者”仍需验证。其他菌种（如Blautia obeum）的协同作用亦不可忽视。研究局限性包括样本量较小和缺乏功能实验，但为菌群-表观遗传互作提供了新证据。未来需探索靶向菌群（如抗生素或益生菌）干预HMCC的可行性。

结论

HMCC具有独特的菌群特征，F. nucleatum可能通过DNA甲基化参与其发病。该发现为CRC的分子分型和精准治疗开辟了新路径。