NET蛋白质组学揭示DADA2患者树突状细胞介导炎症的新通路机制

这篇综述通过蛋白质组学分析揭示了腺苷脱氨酶2缺乏症（DADA2）患者中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的独特分子特征及其通过树突状细胞（DCs）激活炎症通路的机制。研究发现DADA2患者NETs中显著上调的干扰素相关蛋白（如IFI35、STAT1）和损伤相关分子模式（HMGB1）可能驱动自身免疫反应，同时DNase活性缺陷导致NETs清除障碍，为理解DADA2血管病变和免疫失调提供了新视角。

　　

NETs异常与DADA2炎症风暴的分子拼图

引言
腺苷脱氨酶2缺乏症（DADA2）是一种以血管炎、中风和免疫缺陷为特征的自身炎症性疾病。近年研究发现，中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的形成异常可能参与其发病机制。本研究通过多组学方法，揭示了DADA2患者NETs的独特蛋白质谱及其对树突状细胞（DCs）的免疫调控作用。

方法
研究纳入23例DADA2患者、7例结节性多动脉炎（PAN）患者和7例健康对照（HD）。采用成像流式细胞术（IFC）定量"自杀性"和"存活性"NETosis，ELISA检测血浆NETs残留物及DNase活性，并通过高分辨率质谱（Orbitrap Fusion Tribrid）进行定量蛋白质组学分析。DCs功能通过流式细胞术和细胞因子阵列评估。

结果

1. NETosis亢进与清除障碍
   DADA2患者中性粒细胞经PMA刺激后，自杀性NETosis比例显著高于HD和PAN组（p<0.05），且伴随活性氧（ROS）水平升高。尽管60%患者血浆中检测到DNASE1L3，但总DNase活性显著降低（p<0.01），提示存在循环DNase抑制剂。

2. 蛋白质组特征
   在1356个鉴定蛋白中，DADA2组显示：

• 干扰素相关通路激活：STAT1、IFI35和IFIT3在TNFα刺激的NETs中显著富集（FDR=1.51E-06），与Ⅰ型干扰素信号相关。
• 代谢重编程：戊糖磷酸途径（PPP）相关蛋白在PMA刺激后表达上调，支持NETosis的能量需求。
• 血栓调节失衡：PAN组NETs中纤维蛋白原（FGG/FGA）和抗凝蛋白（PROS1）显著下调，可能解释其血栓倾向。

1. DCs的炎症放大器作用
   DADA2患者的NETs能特异性诱导自体单核细胞来源DCs（MODCs）分泌TNFα和IL-6（p<0.01），该效应可被DNase1和重组ADA2逆转。值得注意的是，HMGB1和NLRC4在ADE刺激的NETs中富集，可能通过TLR/RAGE通路增强DCs活化。

讨论
本研究首次描绘了DADA2患者NETs的"分子肖像"：

• 双刃剑DNASE1L3：其异常分布提示可能存在翻译后修饰缺陷或自身抗体干扰。
• 代谢-免疫轴：PPP通路的激活与STAT1信号形成正反馈，或解释患者中观察到的干扰素特征。
• 治疗启示：靶向NETs降解（如DNase1）或特异性阻断HMGB1可能成为DADA2的辅助治疗策略。

结语
这项研究为理解DADA2的血管炎症提供了新视角，将中性粒细胞-树突状细胞对话置于发病机制的核心。未来需进一步探索NETs中修饰蛋白（如氧化α-烯醇化酶）的抗原性，以及ADA2新发现的DNA编辑功能如何影响NETs的免疫原性。