下丘脑kisspeptin通过抑制NF-κB信号通路调控Th1/Th17/Treg平衡缓解重症肌无力

本研究针对重症肌无力(MG)这一自身免疫性疾病，探索了下丘脑神经肽kisspeptin通过GPR54-NF-κB信号轴调控CD4+ T细胞亚群平衡的新机制。研究人员通过临床样本检测、EAMG动物模型和分子生物学实验，首次揭示kisspeptin水平下降与MG发病的相关性，证实其可通过抑制NF-κB通路改善Th1/Th17/Treg失衡，为MG治疗提供了新的潜在靶点。

　　

研究背景
重症肌无力(MG)是一种以神经肌肉接头处自身抗体介导的典型自身免疫性疾病，患者表现为骨骼肌无力和易疲劳性。尽管现有治疗如胆碱酯酶抑制剂和免疫抑制剂能缓解症状，但长期使用伴随严重副作用。近年来，神经免疫学研究发现神经系统与免疫系统存在复杂互动，下丘脑-垂体轴通过分泌多种激素参与免疫调节，但具体机制仍有大量未知领域。

kisspeptin作为下丘脑分泌的神经肽，既往研究主要聚焦于生殖调控，但其在免疫调节中的作用逐渐被揭示——既能抑制肿瘤免疫又能改善类风湿性关节炎等自身免疫病。然而，这种"多面手"分子在MG中的作用仍是空白。基于此，重庆医科大学附属第一医院的研究团队在《Journal of Neuroinflammation》发表重要成果，首次阐明kisspeptin/GPR54系统在MG中的保护作用及分子机制。

关键技术方法
研究采用54例MG患者和20例健康对照的血清样本检测kisspeptin水平；建立实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型，通过腹腔注射kisspeptin类似物KP10或下丘脑立体定位注射AAV-Kiss1病毒进行干预；运用流式细胞术分析CD4⁺
T细胞亚群比例；Western blot检测NF-κB通路蛋白表达；免疫荧光观察神经肌肉接头补体沉积。

主要研究结果

1. MG患者和EAMG大鼠血清kisspeptin水平降低
通过ELISA检测发现，MG患者血清kisspeptin水平显著低于健康对照组，且在眼肌型(OMG)和全身型(GMG)亚组间无差异。EAMG模型大鼠也呈现相同变化趋势，血清kisspeptin水平与体重呈正相关，与临床评分负相关。

2. KP10改善EAMG大鼠临床症状
腹腔注射KP10显著提高EAMG大鼠体重和握力，降低临床评分和抗AChR抗体水平。免疫荧光显示KP10能减少神经肌肉接头补体C5b-9沉积，证实kisspeptin类似物具有治疗潜力。

3. Kisspeptin调控CD4⁺
T细胞亚群平衡
流式分析显示KP10可降低促炎性Th1(CD4⁺
IFN-γ⁺
)和Th17(CD4⁺
IL-17A⁺
)细胞比例，增加调节性Treg(CD4⁺
Foxp3⁺
)细胞比例。这种调控作用可被GPR54拮抗剂KP234逆转，证实其通过受体GPR54发挥作用。

4. NF-κB信号通路是关键作用靶点
RNA测序显示KP10处理显著影响NF-κB通路基因。Western blot证实KP10能抑制p65和IκB磷酸化，而EAMG大鼠CD4⁺
T细胞中NF-κB通路过度激活。下丘脑Kiss1过表达同样通过该通路改善症状，且该效应可被PMA(NF-κB激活剂)处理的CD4⁺
T细胞过继转移所抵消。

5. 下丘脑Kiss1表达下降参与MG发病
免疫荧光和Western blot显示EAMG大鼠下丘脑弓状核(ARC)和室旁核(AVPV)区域Kiss1和cFos表达显著降低，提示神经元活动减少可能是外周kisspeptin水平下降的中枢机制。

研究结论与意义
该研究首次揭示下丘脑kisspeptin通过Kiss1-GPR54-NF-κB信号轴调控CD4⁺
T细胞亚群平衡的新机制：MG患者和模型动物存在kisspeptin水平下降及下丘脑Kiss1表达减少；补充KP10或中枢过表达Kiss1均可通过抑制CD4⁺
T细胞NF-κB通路活化，纠正Th1/Th17/Treg失衡，最终改善临床症状。

这一发现具有多重意义：在理论层面，丰富了神经内分泌-免疫调控网络在自身免疫病中的作用认知；在转化医学层面，GPR54成为潜在治疗靶点，为开发新型MG治疗策略提供方向；在方法学上，结合中枢基因干预和外周细胞过继转移的多层次研究策略为类似研究提供范式。值得注意的是，研究也留下待解问题——MG如何导致下丘脑神经元活动抑制？这将是未来研究的重要切入点。