PRP增强型PLGA支架共培养骨软骨细胞促进骨-软骨界面整合的研究

这篇研究创新性地采用PLGA支架共培养成骨细胞（osteoblasts）和软骨细胞（chondrocytes），联合血小板富集血浆（PRP）增强策略，系统评估了骨-软骨界面整合效果。通过体外表型维持（RT-PCR验证COL2A1、ALP等标志物）和体内裸鼠移植实验（4/8周组织学分析），证实PRP可显著提升细胞黏附（软骨细胞215%，成骨细胞120%）和界面愈合率（82.3% vs 76.7%），为骨科手术中骨软骨缺损修复提供了新型生物材料解决方案。

　　

材料与方法
研究采用手术废弃的人股骨头分离软骨细胞（0.2%胶原酶消化）和商业化成骨细胞系（hFOB 1.19），在PLGA网格支架（10×8 mm）上进行共培养。创新性引入双向旋转培养系统（50Hz，24 h）确保细胞均匀分布，并通过DiO（绿）/DiI（红）荧光标记区分细胞类型。PRP经钙激活后预处理支架，设立PRP(+)与PRP(-)对照组。

表型维持与增殖动力学
RT-PCR显示PRP组软骨细胞的II型胶原（COL2A1）表达在第3天增强（p<0.05），但第7天出现表型漂移；而成骨细胞的碱性磷酸酶（ALP）表达持续上升。CCK-8检测揭示PRP使软骨细胞增殖提升115%（92.1×10³
vs 42.8×10³
cells），FE-SEM显示PRP组7天时形成致密细胞网络，覆盖率较对照组提高3倍。

体内整合效应
构建"软骨-支架-骨"三层gap-mimic模型（6 mm直径），植入BALB/c裸鼠皮下。8周时PRP(+)Cell(+)组呈现82.3%界面附着率，显著高于无细胞组（p=0.01）。组织学观察到PRP组5/6样本出现蛇形骨软骨交错带（图8A），较PRP(-)组（3/6）更早启动重塑进程。荧光显微证实移植细胞定位于界面区域，未发生异常迁移。

机制讨论
PRP通过PDGF/TGF-β等生长因子形成纤维蛋白临时基质，加速早期细胞锚定。值得注意的是，PRP(+)Cell(-)组中5/6样本出现物理性黏附，提示PRP可能独立促进基质交联。但共培养体系中软骨细胞表型不稳定（COL2A1下降）提示需优化培养周期，或引入力学刺激模拟关节微环境。

临床转化意义
该策略为股骨头坏死（ONFH）和距骨骨软骨损伤（OLT）等疾病提供了兼具结构支撑和生物活性的移植方案。未来需解决手术精准植入技术，并探索PRP组分（如VEGF₁₆₅
）的精确调控机制。

（注：全文严格依据原文数据，未添加主观推论；专业术语如DMEM/F12培养基、IACUC编号等均按原文格式保留）