马齿苋提取物通过调控SIRT1/FOXO1通路改善精索静脉曲张大鼠睾丸氧化应激及精子质量的研究

本研究针对精索静脉曲张(Varicocele)导致的男性不育问题，通过建立大鼠模型，探究马齿苋(Malva sylvestris, M.S)提取物对睾丸组织氧化应激(OS)和精子质量的保护作用。研究人员发现M.S通过上调SIRT1和FOXO1基因表达，下调NF-κB、TGF-β和NRF2等促炎因子，显著改善精子活力、减少DNA碎片化(DFI)，恢复线粒体膜电位(MMP)。该研究为天然抗氧化剂治疗精索静脉曲张相关不育提供了新策略，具有重要临床转化价值。

　　

精索静脉曲张是男性不育的主要病因之一，约15%的普通男性和35-75%的不育男性受其困扰。这种疾病导致睾丸静脉丛扩张，引发局部缺氧、热应激和氧化应激(OS)，进而造成精子DNA损伤、线粒体功能障碍和细胞凋亡。虽然显微外科手术是当前首选疗法，但高昂费用和术后残留氧化损伤问题亟待解决。在此背景下，具有抗氧化特性的药用植物马齿苋(Malva sylvestris, M.S)因其富含黄酮类、多酚等活性成分而备受关注。

为探究M.S的治疗潜力，卡拉齐米大学的研究团队开展了一项系统研究。通过建立Wistar大鼠精索静脉曲张模型，研究人员评估了M.S提取物对睾丸组织病理学、精子参数及关键基因表达的影响。研究发现M.S能显著改善精子活力、减少DNA碎片化，并通过调控SIRT1/FOXO1通路减轻氧化损伤。相关成果发表在《Basic and Clinical Andrology》期刊，为开发新型天然抗氧化疗法提供了理论依据。

研究采用的主要技术方法包括：通过左肾静脉部分结扎建立大鼠精索静脉曲张模型；计算机辅助精液分析(CASA)评估精子运动参数；流式细胞术检测活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位(MMP)和细胞凋亡；实时定量PCR(qRT-PCR)分析SIRT1、FOXO1、NRF2等基因表达；组织学染色观察睾丸形态学变化。

【睾丸组织病理学评估】
H&E染色显示精索静脉曲张导致生精小管直径(MSTD)和生精上皮厚度(MSET)显著减小（对照组397.743±7.6μm vs 模型组196.808±13.2μm）。M.S治疗组（特别是750 mg/kg剂量）能明显恢复生精小管结构，增加成熟精子数量，表明其对睾丸组织的保护作用。

【精子参数分析】
计算机辅助精液分析显示，模型组精子前向运动(PR)比例从对照组的31.08%降至11%，而M.S 750 mg/kg治疗组显著提升至51.11%。精子正常形态率也从模型组的极低水平恢复至接近正常，证实M.S对精子质量的改善效果。

【DNA碎片化检测】
通过精子染色质结构分析(SCSA)发现，模型组DNA碎片化指数(DFI)显著升高，而M.S治疗组（尤其是750 mg/kg）DFI明显降低，表明其能有效保护精子DNA完整性。

【氧化应激与线粒体功能】
流式细胞术检测显示，模型组ROS水平显著增加，线粒体膜电位(MMP)明显降低。JC-1染色证实M.S治疗可恢复线粒体功能，750 mg/kg组橙色荧光强度显著增强，提示凋亡减少。

【基因表达调控】
qRT-PCR结果显示，M.S通过上调SIRT1（沉默信息调节因子1）和FOXO1（叉头框蛋白O1）表达，同时下调NF-κB（核因子κB）、TGF-β（转化生长因子β）和NRF2（核因子E2相关因子2），形成抗氧化-抗炎协同作用网络。

【细胞凋亡分析】
Annexin V检测发现模型组次级凋亡和坏死细胞比例显著增加，而M.S 750 mg/kg治疗组存活细胞比例明显提高，表明其能有效阻断凋亡进程。

研究结论与讨论部分指出，M.S提取物通过多靶点作用机制改善精索静脉曲张相关的睾丸损伤：1）直接清除ROS，抑制NADPH氧化酶活性；2）激活SIRT1/FOXO1通路，增强细胞抗氧化防御能力；3）抑制NF-κB介导的炎症反应；4）减少caspase-3依赖性凋亡。特别值得注意的是，750 mg/kg剂量显示出最佳治疗效果，而1500 mg/kg剂量反而出现细胞毒性，提示剂量选择的重要性。

该研究的创新点在于首次系统阐明了M.S通过调控SIRT1/FOXO1/NF-κB信号网络改善精索静脉曲张相关不育的分子机制，为开发植物源性抗氧化疗法提供了实验依据。未来研究可进一步优化给药方案，并探索其作为手术辅助治疗的临床应用潜力。局限性包括未进行蛋白质水平验证和人体试验，这些将是后续研究的重点方向。