定坤丹通过抑制cGAS-STING通路抑制神经元铁死亡和神经炎症改善帕金森病小鼠症状

本研究针对帕金森病(PD)治疗中多靶点干预的需求，通过多组学技术揭示传统中药定坤丹(DZP)通过调控cGAS-STING通路抑制神经元铁死亡(ferroptosis)和神经炎症的分子机制。研究发现DZP含8种活性成分可靶向ATP7A、SLC7A11等关键蛋白，显著改善MPTP诱导的PD小鼠运动障碍并修复黑质多巴胺能神经元，为开发PD新型治疗策略提供科学依据。

　　

帕金森病作为全球增长最快的神经系统疾病，目前临床治疗面临两大困境：左旋多巴等药物长期使用会产生运动并发症，而单靶点药物难以应对疾病复杂的病理机制。在这一背景下，多组分、多靶点的传统中药展现出独特优势。定坤丹作为临床验证有效的复方制剂，虽已显示改善PD症状的潜力，但其具体作用机制仍是未解之谜。

中国中医科学院基础理论研究所的研究团队通过整合行为学评估、代谢组学、蛋白质组学和网络药理学等多学科方法，系统揭示了定坤丹的神经保护机制。研究首先建立MPTP诱导的PD小鼠模型，采用开场实验、转棒测试等行为学方法评估药效；运用UPLC-MS/MS技术分析血清代谢物；通过DIA定量蛋白质组学解析脑组织蛋白变化；结合分子对接验证活性成分与靶标相互作用；最后通过免疫荧光和Western blot验证关键通路。

研究结果部分：

1. DZP改善PD小鼠运动障碍：行为学测试显示，DZP治疗显著增加小鼠在开场实验中的活动距离和中心区域停留时间，延长转棒测试持续时间，并降低震颤评分（图1B-G）。

2. DZP修复黑质神经元：免疫荧光证实DZP能显著恢复黑质区酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量，同时减少α-突触核蛋白(α-syn)异常聚集（图2A-C）。

3. 活性成分鉴定：从血清中鉴定出460种代谢物，其中86种差异表达，包括黄酮类（如大豆苷元Daidzein）、三萜类（如熊果酸Ursolic acid）等（图3A-E，表1）。

4. 多靶点作用机制：网络药理学筛选出ATP7A、SLC7A11等8个核心靶点，分子 docking显示其与活性成分结合能良好（图7A-H，表3）。蛋白质组学发现DZP调控9393种蛋白，涉及铁死亡、神经退行性疾病等通路（图5A-F，表2）。

5. 通路验证：DZP显著抑制cGAS-STING通路激活，降低GFAP、TNF-α等炎症标志物，同时上调GPX4、SLC7A11等铁死亡抑制蛋白（图8A-M）。

这项研究首次阐明定坤丹通过"多成分-多靶点-多通路"协同作用治疗PD的机制：8种活性成分直接作用于ATP7A、GSK3β等靶点，通过抑制cGAS-STING通路减轻神经炎症，同时调控GPX4/SLC7A11/ACSL4轴抑制铁死亡（图9）。该发现不仅为传统中药现代化研究提供范式，更重要的是为开发兼具抗炎和抗铁死亡功能的PD治疗策略奠定基础。研究采用的"行为学-代谢组-蛋白质组-网络药理学"整合策略，也为复杂中药系统的机制解析提供了可借鉴的技术路线。