外显子连接复合体介导的circSRPK1通过hnRNP A2B1调控RON可变剪接促进胃癌进展的机制研究

本研究聚焦胃癌(GC)中异常剪接受体酪氨酸激酶RON的关键作用，首次揭示SRPK1来源的环状RNA circSRPK1通过hnRNP A2B1核转位调控RONΔ160生成的分子机制。浙江大学团队发现MAGOH-EIF4A3复合物驱动circSRPK1环化，激活hnRNP A2B1与RON mRNA外显子剪接增强子(ESE)结合，促进促癌亚型RONΔ160产生。该研究为circRNA介导的可变剪接(AS)调控网络提供新证据，为胃癌靶向治疗开辟新思路。

　　

胃癌作为全球死亡率第四的消化道恶性肿瘤，其高异质性和晚期诊断率导致治疗困境。近年来研究发现，受体酪氨酸激酶RON的可变剪接亚型RONΔ160在胃癌进展中起关键作用，但调控机制尚未阐明。与此同时，丝氨酸/精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)虽被公认是剪接调控的核心激酶，其衍生的环状RNA(circRNA)功能仍属未知。这些科学空白促使浙江大学医学院附属第一医院团队开展深入研究，最终揭示circSRPK1通过hnRNP A2B1调控RON剪接的新机制，相关成果发表于《Cancer Letters》。

研究采用临床队列（50对GC/癌旁组织）、circRNA测序、RNA免疫共沉淀(RIP)、RNA pull-down、荧光原位杂交(FISH)、核质分离等技术，结合体内外功能实验，系统解析了circSRPK1的生物学功能与作用机制。

【Identification and characterization of a novel circRNA generated from the SRPK1 gene in GC】
通过SRPK1 siRNA筛选发现靶向外显子11/13的siRNA可特异性抑制RONΔ160产生，提示SRPK1可能通过非编码RNA形式发挥作用。circRNA测序鉴定出hsa_circ_0076168（命名为circSRPK1）在GC组织中显著上调，其由SRPK1基因外显子2-4反向剪接形成，具有抗核酸酶特性。临床分析显示circSRPK1高表达与不良预后显著相关。

【Clinical samples】
队列1（50例GC患者）和队列2（独立验证队列）的组织样本分析证实circSRPK1在GC中的表达特征。功能实验证明circSRPK1敲除可抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭，裸鼠模型显示其显著抑制肿瘤生长和肺转移。

【Discussion】
机制研究发现：1）外显子连接复合体(EJC)组分MAGOH通过增强EIF4A3与pre-mRNA结合促进circSRPK1环化；2）circSRPK1直接结合hnRNP A2B1蛋白，诱导其核转位并与RON mRNA的ESE元件结合；3）该互作促使RON pre-mRNA剪接为促癌亚型RONΔ160。值得注意的是，MAGOH敲除可逆转circSRPK1介导的恶性表型，证实EJC-circSRPK1-hnRNP A2B1-RONΔ160轴的关键作用。

该研究首次阐明：1）SRPK1可通过产生circRNA而非其激酶活性调控剪接；2）EJC组分MAGOH是circRNA生物发生的新调控因子；3）circSRPK1-hnRNP A2B1互作模式为RNA-蛋白相互作用提供新范式。这些发现不仅拓展了对circRNA功能的认识，更为胃癌的分子分型和靶向治疗提供了潜在新靶点，特别是针对肿瘤特异性剪接变体的干预策略具有重要转化价值。作者团队特别致谢杭州沃健医疗科技有限公司的技术支持，研究受国家自然科学基金（82373246、82072631）资助。