Siglec配体免疫组化揭示其与免疫排斥及患者生存的关联机制

【编辑推荐】本研究针对肿瘤免疫微环境(TIME)中唾液酸-Siglec介导的免疫逃逸机制缺乏有效检测工具的难题，开发了新型HYDRA系列免疫组化(IHC)试剂，首次系统揭示Siglec-3/7/9配体在10种癌症中的空间分布特征，发现其与CD8+ T细胞浸润负相关（r=-0.44,p<0.001），且肿瘤-基质界面高表达预示不良预后（HR 2.60），为独立于传统炎症指标的生存预测提供了新靶点。

　　

在肿瘤免疫治疗时代，一个令人困惑的现象是：为何部分具有"热肿瘤"特征（如CD8⁺
T细胞浸润）的患者仍对免疫治疗无应答？近年研究发现，肿瘤细胞表面过度表达的唾液酸（sialic acid）可能通过结合免疫细胞表面的Siglec受体（如Siglec-3/7/9），激活抑制性信号通路形成"糖免疫检查点"。然而，这一机制的研究长期受限于缺乏可靠的检测工具。来自约翰霍普金斯大学的研究团队联合Palleon Pharmaceuticals，开发出突破性的HYDRA系列多聚体Siglec检测试剂，首次在《Laboratory Investigation》上系统揭示了Siglec配体在肿瘤微环境中的空间分布规律及其临床意义。

研究采用三大关键技术：1）基于Leica BOND RX全自动染色平台优化IHC方案，使用Palleon提供的HYDRA-3/7/9试剂检测10种癌症组织；2）在黑色素瘤组织微阵列(TMA)上结合6色多重免疫荧光（CD8/CD163/FoxP3/PD1/PDL1/Sox10/S100）分析免疫细胞浸润；3）通过数字化病理定量评估肿瘤核心与基质界面的配体表达差异。

【Reagent workup and finalized IHC staining protocol】
研究人员建立的标准化流程显示，HYDRA-9在10种癌症中染色范围最广，而扁桃体组织作为阴性对照验证了试剂特异性。

【Finalized IHC staining protocol results】
在黑色素瘤中，Siglec-3/9配体表达与CD8⁺
T细胞浸润呈显著负相关（r=-0.29,p=0.001），尤其在肿瘤-基质界面相关性更强（r=-0.44,p<0.001）。空间分析发现，界面与核心区的配体表达比值具有预后价值：Siglec-3高比值患者死亡风险增加2.6倍（HR 2.60），而CD8⁺
浸润本身未显示生存差异。

【Discussion】
该研究首次证实Siglec配体的空间分布模式是独立于PD-L1等传统指标的预后因素。肿瘤边缘的"糖免疫检查点"可能通过双重机制促进免疫逃逸：既直接抑制CD8⁺
T细胞功能，又诱导M2型巨噬细胞极化。值得注意的是，Siglec-9在T细胞的表达提示其可能介导T细胞耗竭，这为联合靶向PD-1和Siglec通路的治疗策略提供了理论依据。

这项研究不仅建立了首个可临床转化的Siglec配体检测方案，更开创性地提出了"空间糖组学"概念——肿瘤边缘的特定糖基化模式可能成为预测免疫治疗应答的新一代生物标志物。正如通讯作者JCS强调的，该发现为克服当前免疫治疗耐药性开辟了全新研究方向，未来针对Siglec-sialic acid轴的靶向干预或可重塑肿瘤免疫微环境。