铝佐剂灭活疫苗联合PlpE多表位蛋白增强对禽多杀性巴氏杆菌感染的免疫保护效果评估

为解决禽多杀性巴氏杆菌(Pm)传统疫苗免疫原性不足的问题，研究人员通过生物信息学筛选PlpE蛋白优势抗原表位，构建重组多表位蛋白并联合铝佐剂灭活疫苗，在鸡模型中验证其免疫保护效果。结果显示，联合疫苗组存活率达80%，显著高于单一疫苗组，且病理损伤减轻、IgG水平显著提升，为开发高效禽霍乱疫苗提供了新策略。

　　

禽霍乱是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)引起的严重禽类传染病，每年给全球家禽业造成重大经济损失。目前使用的灭活疫苗和弱毒疫苗存在免疫原性有限、交叉保护不足或毒力返强等缺陷，亟需开发更安全高效的疫苗策略。四川农业大学的研究团队在《Poultry Science》发表的研究中，创新性地将生物信息学预测的PlpE蛋白多表位片段与铝佐剂灭活疫苗联用，显著提升了疫苗保护效力。

研究通过生物信息学工具（SignalP 5.0、SOPMA、IEDB等）预测PlpE蛋白的B细胞和T细胞优势表位，筛选出含3个B细胞表位和5个Th细胞表位的26-164aa区段，利用pCold-SUMO载体实现可溶性表达。从四川邛崃分离的Pm本地毒株（LD₅₀
=12 CFU）制备铝佐剂灭活疫苗，与PlpE多表位蛋白配伍后，通过鸡模型评估免疫效果。

分析Pm部分生物学特性
分离菌株在血琼脂平板上呈灰白色非溶血性菌落，革兰染色为阴性短杆菌，16S rRNA测序证实为Pm（与VP161株同源性98%）。生长曲线显示10小时达对数生长期峰值。

PlpE抗原表位预测
预测发现PlpE含8个B细胞表位（如108-123aa的YHVSEWGNASNNVDKD）和11个T细胞表位（如61-69aa的ATNTSLHDK），选择26-164aa富含表位区段表达37kDa重组蛋白，Western blot验证成功。

免疫保护实验结果
联合疫苗组存活率（80%）显著高于单一灭活疫苗组（70%）和PlpE蛋白组（50%）。病理评分显示联合疫苗组肝脏坏死灶、肺充血和脾肿大程度最轻，IgG水平较其他组提高1.5-2倍（p<0.01）。

讨论与意义
该研究首次将表位筛选技术与传统灭活疫苗结合，证实PlpE多表位蛋白能增强铝佐剂疫苗的免疫应答。其创新点在于：1）通过截短表达解决全长蛋白难溶性问题；2）表位富集区保留了天然构象免疫原性；3）为开发多价表位疫苗提供模板。尽管保护率未达100%（可能与佐剂选择有关），但相比商用弱毒疫苗G₁₉₀
E₄₀
（50%保护率）具有明显优势。未来可探索其他佐剂（如CpG）或融合其他毒力因子（如OmpH）以进一步提升保护效果，为禽霍乱防控提供新思路。