生物素干扰对临床免疫检测的影响及新型Elecsys试剂的优化策略

本研究针对生物素(Biotin)干扰临床免疫检测(如甲状腺功能测试TG/FT4 和肿瘤标志物AFP/CEA)的关键问题，通过比较罗氏新旧Elecsys试剂性能，发现新型试剂可耐受1000-3000 ng/mL生物素，并验证磁珠耗竭法可有效消除干扰。该成果为透析和ICU患者(平均生物素水平3.2 ng/mL)的检测准确性提供解决方案，对优化免疫检测体系具有重要临床意义。

　　

在临床实验室检测中，生物素(Biotin)这个看似普通的维生素B₇
，正悄然成为干扰免疫检测结果的"隐形杀手"。随着生物素补充剂在透析患者和ICU病房的广泛使用，其血清浓度可飙升至3.2 ng/mL，远超普通人群的0.1-0.8 ng/mL水平。更棘手的是，采用生物素-链霉亲和素(Biotin-Streptavidin)系统的罗氏Cobas检测平台，会因过量生物素导致甲状腺球蛋白(TG)假阴性或游离甲状腺素(FT₄
)假阳性等严重误诊。2017年FDA就曾报告过因生物素干扰导致心肌肌钙蛋白检测错误引发的死亡案例，这使得解决生物素干扰成为临床检验领域的迫切需求。

台湾大学癌症中心的研究团队在《Practical Laboratory Medicine》发表的重要研究，系统评估了生物素对不同检测系统的影响。研究人员收集了78例来自健康管理中心、急诊科、ICU、妇科和血液透析科的患者样本，采用ELISA检测生物素水平，并通过生物素加标实验、磁珠耗竭法和对比罗氏Cobas e602与Abbott Architect i2000SR系统，全面评估了干扰程度和解决方案。

关键技术方法包括：1) 跨科室患者队列(n=78)的生物素水平筛查；2) 梯度生物素(0-3000 ng/mL)加标实验评估新旧Elecsys试剂差异；3) 链霉亲和素磁珠耗竭法优化；4) 双平台(Roche vs Abbott)干扰对比分析。

研究结果首先揭示了生物素在特殊人群中的分布特征。如图1所示，血液透析患者(3.282±0.346 ng/mL)和ICU患者(3.212±2.707 ng/mL)的生物素水平显著高于其他科室(p<0.05)，这与这些患者常规服用含生物素的维生素补充剂有关。更值得注意的是，10例透析患者在治疗后的生物素水平显著下降，提示检测时机对结果准确性至关重要。

在试剂性能比较方面，研究发现罗氏旧试剂在生物素>500 ng/mL时即出现20%的检测偏差：TG和AFP呈假阴性，ATG和FT₄
呈假阳性(图2)。而新试剂表现出显著更强的耐受性，在1000-3000 ng/mL范围内仍保持稳定(表3)。例如FT₄
检测，旧试剂在200 ng/mL时即超阈值，而新试剂耐受>1500 ng/mL，与说明书宣称的1200 ng/mL基本吻合。

磁珠耗竭法的验证结果令人振奋(图3)。使用20 μL链霉亲和素磁珠处理30分钟，可有效恢复旧试剂在400 ng/mL生物素干扰下的检测准确性。以TG检测为例，耗竭后600 ng/mL组的回收率从-100%提升至-57%(p<0.05)。不过研究人员指出，对于已采用新试剂的检测项目，这种前处理可能并非必需。

平台对比实验(图4)揭示了一个有趣现象：Abbott系统因采用不同原理，在500-3000 ng/mL生物素范围内所有检测指标均保持稳定(表5)，而罗氏系统的CEA、CA125等肿瘤标志物在500 ng/mL时即出现30%以上的偏差。这为存在生物素干扰风险的特定检测项目提供了替代方案选择依据。

在讨论部分，作者强调了三个临床实践要点：首先，透析和ICU患者应至少在采血前72小时停用生物素补充剂；其次，当检测结果与临床表现不符时，应主动询问患者补充剂使用史；最后，对于无法避免生物素干扰的情况，可采用20 μL链霉亲和素磁珠进行30分钟预处理，这种方法可有效中和100 mg口服剂量产生的干扰。

该研究的创新性在于首次系统评估了台湾地区医院生物素干扰现状，并验证了新型Elecsys试剂的实际性能。Kuo-Chun Chiu等研究者不仅证实了罗氏新试剂对说明书指标的达标情况，还发现了AFP等部分检测项目的实际耐受度(>3000 ng/mL)甚至优于厂商声明。这些发现为临床实验室应对日益普遍的营养补充剂干扰问题，提供了兼具科学性和操作性的解决方案。

值得注意的是，研究也存在样本量有限等局限性。作者建议未来通过多中心合作扩大样本量，特别是追踪透析患者生物素药代动力学变化。随着300 mg高剂量生物素在美国多发性硬化症治疗中的应用推广，开发更高效的干扰消除方法将成为重要研究方向。这项来自台湾大学的研究，为全球临床实验室应对生物素干扰挑战贡献了重要的亚洲人群数据和实践方案。