二硫苏糖醇(DTT)浓度筛选及应用研究：纠正D-二聚体假性升高的有效策略

本研究针对免疫法检测D-二聚体(D-dimer)易受干扰导致假性升高的临床难题，系统评估了二硫苏糖醇(DTT)的优化浓度及校正效能。通过比较不同浓度DTT(0.01-0.20 mol/L)与替代免疫检测法的效果，发现0.01 mol/L DTT可特异性纠正假阳性结果，且不影响真实升高样本，为临床提供了一种经济可靠的标准化解决方案。

　　

在临床诊断中，D-二聚体(D-dimer)检测犹如一把"双刃剑"——作为纤维蛋白降解的标志物，它在排除静脉血栓栓塞症(VTE)时具有高达98%的阴性预测价值，但免疫检测方法却常因异嗜性抗体、类风湿因子等干扰物质而"谎报军情"，导致假阳性结果。这种假象可能引发不必要的影像学检查、错误抗凝治疗，甚至给患者带来沉重的经济和心理负担。尽管稀释试验、更换检测抗体等方法被尝试用于纠偏，但效果参差不齐且缺乏标准化方案。

南京大学医学院附属鼓楼医院的研究团队在《Practical Laboratory Medicine》发表的研究中，创新性地将还原剂二硫苏糖醇(DTT)引入D-dimer检测的纠偏领域。研究人员首先通过Sysmex CS5100凝血分析仪筛选出7例假性升高样本作为实验组，另选取30例真实升高样本作为对照组。采用四梯度DTT浓度(0.01-0.20 mol/L)处理样本后，使用Stago STA-R Max分析仪进行对比验证。关键技术包括：免疫比浊法检测D-dimer/FDP、DTT梯度浓度实验设计、统计学分析采用Friedman检验与Bonferroni校正等。

研究结果显示三个关键发现：在"真实升高组"中，0.01 mol/L DTT处理后的D-dimer水平与生理盐水(NS)对照组无显著差异(P>0.05)，而更高浓度(≥0.05 mol/L)则会导致D-dimer值异常降低(P<0.05)；在"实验组"中，0.01 mol/L DTT使所有样本恢复FDP>D-dimer的正常比值，校正效果与更换免疫检测方法相当(P>0.05)；通过计算D-dimer/参考值上限(ULRR)比率发现，DTT处理组与替代方法组的校正结果无统计学差异。

讨论部分深入阐释了DTT的作用机制：作为二硫键还原剂，DTT可能通过破坏干扰抗体(如异嗜性抗体)的关键二硫键结构，阻止其桥接检测系统中的捕获/检测抗体，从而消除假信号。值得注意的是，0.01 mol/L的优化浓度既能有效消除干扰，又不会影响真实病理状态下的D-dimer水平，这个"精准阈值"的确定为临床实践提供了重要依据。相比价格高昂的异嗜性抗体阻断剂(HBR)或操作繁琐的检测方法更换，DTT校正法具有成本低廉(每测试约0.5元)、操作简便(30分钟室温孵育)的优势，特别适合基层医院推广。

该研究首次建立了DTT校正D-dimer假性升高的标准化方案，其创新性体现在：通过浓度梯度实验明确了"有效不干扰"的临界值；采用双盲法验证了DTT与金标准方法的一致性；提出了FDP/D-dimer比值作为判断校正效果的客观指标。这些发现为临床实验室处理免疫检测干扰提供了新思路，未来可扩展应用于其他易受干扰的免疫检测项目(如肿瘤标志物、心肌标志物等)，具有广阔的转化应用前景。