亚油酸通过FFAR1/FFAR4通路促进三阴性乳腺癌4T1细胞转移及小鼠模型肿瘤生长的机制研究

本研究针对三阴性乳腺癌(TNBC)高转移特性的营养调控机制，发现亚油酸(LA)通过激活FFAR1/FFAR4受体，显著增强4T1细胞的迁移、侵袭及MMP-2/MMP-9分泌，并在Balb/cJ小鼠模型中证实LA预处理可促进肿瘤体积增长和脑/肺转移。该研究为膳食n-6脂肪酸与TNBC进展的关联提供了直接实验证据。

　　

乳腺癌是全球女性癌症死亡的首要原因，其中三阴性乳腺癌（TNBC）因缺乏雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（Her2/neu）表达，治疗选择有限且预后较差。近年来，膳食因素特别是n-6多不饱和脂肪酸的摄入与乳腺癌风险的关联备受关注。亚油酸（LA）作为西方饮食中最主要的omega-6脂肪酸，既往研究显示其能通过表皮生长因子受体（EGFR）和磷脂酶D（PLD）等通路促进乳腺癌细胞转移，但LA在免疫健全动物模型中如何影响TNBC的肿瘤生长和转移尚不明确。

为探究这一问题，来自墨西哥的研究团队在《Prostaglandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids》发表了创新性研究。该团队采用划痕实验、Transwell侵袭实验和明胶酶谱分析等技术，结合Balb/cJ小鼠TNBC模型，系统评估了LA对4T1细胞转移特性的影响及其体内效应。

关键方法
研究通过体外实验分析LA对4T1细胞迁移（划痕实验）、侵袭（Matrigel基质）及MMP-2/MMP-9分泌（明胶酶谱）的影响；采用FFAR1抑制剂DC260126和FFAR4抑制剂AH7614验证受体机制；建立Balb/cJ小鼠模型，比较LA预处理与未处理4T1细胞的成瘤差异，通过组织病理学评估转移灶。

主要结果

1. LA通过FFAR1/FFAR4诱导4T1细胞迁移
   划痕实验显示60 μM LA处理24小时使4T1细胞迁移能力提升3倍（P<0.001），该效应可被受体抑制剂完全阻断。值得注意的是，同等浓度的油酸（OA）未显示促迁移作用，证实LA的特异性。

2. LA增强侵袭与MMP分泌
   Boyden小室实验表明LA使4T1细胞侵袭能力提高2.5倍（P<0.01），同时明胶酶谱检测到MMP-2和MMP-9分泌量分别增加1.8倍和2.3倍（P<0.05）。

3. LA预处理促进小鼠肿瘤生长
   LA预处理7天的4T1细胞接种后，小鼠乳腺肿瘤重量（93.6±38.79 mg vs 14.81±2.21 mg）和体积（0.056±0.015 cm³
   vs 0.0128±0.004 cm³
   ）均显著增加（P<0.01）。组织学显示LA组肿瘤细胞呈现更明显的梭形核和胞外基质沉积。

4. LA加剧脑肺转移
   LA组小鼠脑转移发生率从16.7%升至83.3%（P<0.05），肺转移从66.7%升至100%，且单个器官转移灶总数显著增加（脑：1→6；肺：4→14）。病理证实转移灶为典型上皮源性肿瘤细胞巢。

讨论与意义
该研究首次在免疫健全动物模型中证实，生理浓度（仅为血浆水平的1/38）的LA即可通过FFAR1/FFAR4双重激活，驱动TNBC的转移级联反应。这一发现为解释高LA饮食地区TNBC高发提供了分子依据：LA不仅通过MMP-2/MMP-9促进基底膜降解，还可能通过EMT（上皮-间质转化）赋予癌细胞转移潜能。研究创新性地揭示脂肪酸受体可作为TNBC治疗的潜在靶点，并为临床建议限制n-6脂肪酸摄入提供了实验支持。未来研究可进一步探索FFAR1/FFAR4下游的Gαi/Gq信号通路在LA促转移中的作用机制。