GLP-1受体激动剂通过AMPK/SIRT1通路调控脂代谢与自噬改善非酒精性脂肪肝的机制研究

非酒精性脂肪肝（NAFLD）缺乏特效治疗药物，南京溧水人民医院团队以胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RAs）代表药物利拉鲁肽（LRG）为研究对象，通过FFA诱导的肝细胞模型，揭示其通过激活AMPK/SIRT1通路调控脂代谢（FAS/ACC1↓、ATGL/HSL↑）并增强自噬（LC3B-II↑、p62↓）的分子机制，为NAFLD靶向治疗提供新策略。

　　

非酒精性脂肪肝（NAFLD）已成为全球最常见的慢性肝病，影响着约四分之一人口。随着肥胖和糖尿病流行，其进展形式非酒精性脂肪性肝炎（NASH）发病率预计十年内激增56%，导致终末期肝病和肝移植需求剧增，给医疗系统带来沉重负担。尽管NAFLD与代谢综合征密切相关，但美国FDA迄今未批准任何特效药物。现有治疗依赖生活方式干预和糖尿病药物（如二甲双胍、SGLT-2抑制剂）的跨适应症使用，而胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RAs）虽在糖尿病合并NAFLD患者中显示疗效，其单独作用机制尚不明确。

南京溧水人民医院与江苏医药职业学院联合团队在《Prostaglandins》发表研究，首次系统阐明GLP-1RAs代表药物利拉鲁肽（LRG）通过AMPK/SIRT1通路调控脂代谢与自噬改善NAFLD的分子机制。研究人员采用FFA（游离脂肪酸）诱导的HepG2和HL-7702肝细胞模型模拟NAFLD病理环境，通过MTT法检测细胞活力，油红O染色定量脂滴沉积，Western blot分析脂代谢关键蛋白（FAS/ACC1/ATGL/HSL/LAL）和自噬标志物（LC3B-II/p62/Beclin1），结合mCherry-GFP-LC3双荧光示踪和透射电镜观察自噬流，并运用SIRT1 siRNA敲降和AMPK抑制剂（Compound C）验证通路机制。

研究结果显示：

1. FFA诱导肝细胞脂肪变性被LRG逆转
   MTT实验证实100 nM LRG最佳改善FFA导致的细胞活力下降（p<0.01），油红O染色显示LRG浓度依赖性减少脂滴沉积（200X镜检），同时甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）含量显著降低（p<0.05）。

2. LRG双向调控脂代谢关键酶
   Western blot揭示LRG下调脂肪合成酶FAS和ACC1表达（p<0.01），上调脂肪分解酶ATGL、HSL及溶酶体脂肪酶LAL（p<0.05），提示其通过抑制新生脂肪生成并促进脂解改善肝细胞脂肪堆积。

3. 自噬激活是LRG核心作用机制
   FFA抑制的自噬标志物LC3B-II和Beclin1被LRG显著恢复（p<0.01），自噬底物p62降解增加。双荧光系统显示LRG促进自噬体（黄色 puncta）向自溶酶体（红色 puncta）转化，电镜直接观察到自噬泡数量增加（黄色箭头示脂滴，红色箭头示自噬体）。

4. AMPK/SIRT1通路是核心调控枢纽
   LRG浓度依赖性提高磷酸化AMPK（p-AMPK）与SIRT1蛋白水平（p<0.05）。SIRT1敲降后，LRG对脂代谢酶和自噬的调控作用被取消；而AMPK抑制剂CC处理则抑制SIRT1上调，证实AMPK位于SIRT1上游的级联调控关系。

这项研究首次阐明GLP-1RAs通过AMPK/SIRT1通路"双管齐下"改善NAFLD的机制：既通过抑制脂肪合成（FAS/ACC1↓）和促进脂解（ATGL/HSL/LAL↑）直接调节脂代谢，又通过增强自噬（lipophagy）加速脂滴清除。该发现为NAFLD治疗提供了新靶点——目前临床应用的GLP-1类药物（如利拉鲁肽、司美格鲁肽）可能通过此机制发挥肝脏保护作用。研究同时指出未来方向：需解决注射给药依从性问题，开发高生物利用度口服制剂将是突破重点。

值得注意的是，尽管肝细胞本身不表达GLP-1受体，但该研究通过体外实验证实LRG可直接作用于肝细胞，暗示其可能存在非经典受体途径。团队采用的FFA诱导模型较好模拟了NAFLD核心病理特征，且通过SIRT1基因干预和AMPK药理学抑制构建了完整的证据链。这些发现不仅为GLP-1类药物拓展适应症提供理论依据，也为开发新型AMPK/SIRT1靶向药物奠定基础。