靶向GFAP的单克隆抗体策略：通过调控胶质细胞活性和神经炎症实现青光眼神经保护的新突破

本研究针对青光眼神经退行性病变中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)过表达引发的神经炎症问题，开发了靶向GFAP的单克隆抗体(GFAP mAb)。通过建立眼高压(OHT)青光眼大鼠模型和钴氯化物(CoCl2 )诱导的R28细胞退变模型，发现25μg剂量GFAP mAb可显著抑制星形胶质细胞和小胶质细胞活化，通过阻断p38 MAPK/NF-κB通路和NLRP3/Caspase-1/GSDMD轴减轻神经炎症和细胞焦亡(pyroptosis)，最终保护视网膜神经节细胞(RGCs)结构和功能。该研究为青光眼免疫治疗提供了新靶点，发表于《Journal of Neuroinflammation》。

　　

青光眼作为全球不可逆性致盲的首要病因，其核心病理特征是视网膜神经节细胞(RGC)的进行性丢失。尽管降低眼压(IOP)是当前唯一临床有效手段，但约30%患者病情仍会进展，这促使研究者将目光投向神经保护策略。在青光眼发病机制中，星形胶质细胞的异常活化（表现为胶质纤维酸性蛋白GFAP过表达）及其驱动的神经炎症被认为是加速RGC死亡的关键环节。然而，如何精准调控GFAP介导的胶质反应性，成为领域内亟待解决的科学问题。

德国美因茨大学医学中心的研究团队在《Journal of Neuroinflammation》发表了一项突破性研究。他们创新性地采用靶向GFAP的单克隆抗体(GFAP mAb)干预策略，通过系统性实验证实：适度抑制GFAP可打破胶质细胞过度活化-神经炎症恶性循环，为青光眼治疗提供了全新免疫调节靶点。

研究主要采用四种关键技术：1) 通过巩膜静脉结扎(EVO)建立慢性眼高压青光眼大鼠模型；2) 光学相干断层扫描(OCT)和全视野视网膜电图(ERG)纵向监测视网膜神经纤维层(RNFL)厚度和视网膜功能；3) 高灵敏度蛋白微阵列分析炎症介质表达谱；4) 钴氯化物(CoCl₂
)诱导的R28视网膜前体细胞退变模型评估细胞保护机制。

研究结果部分：

Characterization of IOP elevation and progressive RNFL loss
EVO手术成功诱导大鼠眼压持续升高（15.2±1.5 mmHg vs 正常10.1±0.3 mmHg），伴随RNFL厚度进行性减少至基线74.9%。GFAP mAb治疗显著延缓RNFL变薄，25μg剂量组保护效果最佳（86.5%保留率）。

ERG-based evaluation of retinal dysfunction
25μg GFAP mAb组完全保留光负波(PhNR)振幅（Δ=2.4%），提示RGC电生理功能维持。50μg组虽抑制星形胶质细胞活化更显著，但对ERG保护效果反而不及25μg组，暗示过度抑制可能损害神经支持功能。

GFAP mAb promotes RGC survival
免疫荧光显示25μg剂量使RGC密度恢复至正常水平（1892±228 vs 车辆组1552±81 cells/mm²
），中间区保护效果尤为显著（2015±244 vs 1512±109 cells/mm²
）。

Dose-dependent inhibition of astrocyte activation
Western blot显示25-50μg GFAP mAb显著下调GFAP蛋白表达（p<0.01），免疫荧光显示反应性星形胶质细胞分支减少，结构更规则。但50μg剂量对微胶质细胞活化的抑制效果反而减弱，提示剂量敏感性。

Modulation of microglial activation
25μg剂量使Iba1⁺
小胶质细胞密度恢复至正常（1.00±0.28倍），但50μg剂量无显著效果（1.71倍），蛋白微阵列显示CD68表达变化趋势一致。

Inhibition of NF-κB and p38 MAPK pathways
25μg GFAP mAb显著降低NF-κB p65磷酸化（p=0.045）和p38 MAPK活化（p<0.0001），这可能是其抗炎作用的核心机制。

Microarray reveals broad anti-inflammatory effects
25μg剂量显著下调TLR4、S100A8、NLRP3等炎症小体组分，同时降低TNF-α、IL-1β等促炎因子，升高抗炎因子IL-10（p=0.019）。

In vitro cytoprotection against pyroptosis
8μg/ml GFAP mAb使CoCl₂
处理的R28细胞存活率提升2.3倍，LDH释放减少53%，通过抑制GSDMD膜孔形成和NLRP3/Caspase-1通路实现。

Bioinformatic validation
对公共数据集PXD005258的再分析显示，GFAP和Caspase-1是青光眼视网膜蛋白互作网络的核心节点，佐证了实验发现的调控通路。

这项研究具有三重突破性意义：首先，首次证实补充GFAP抗体可纠正青光眼患者天然抗体不足的病理状态；其次，揭示25μg为最佳治疗剂量，过高剂量可能破坏胶质细胞稳态；最后，阐明GFAP mAb通过双重机制发挥作用——在体抑制胶质细胞活化，体外直接阻断焦亡通路。研究为开发青光眼联合治疗策略（IOP控制+免疫调节）提供了理论依据，GFAP抗体也有望拓展应用于阿尔茨海默病等其它神经退行性疾病。

局限性在于仅使用雌性动物模型，且R28细胞系不能完全模拟成熟胶质细胞行为。未来研究需探索人源化抗体开发，并评估在氧化应激等其他病理场景中的保护效果。