EGFRvIII 阳性胶质母细胞瘤通过c-Fos-MDK-LRP1轴驱动免疫逃逸与恶性进展的机制研究

本研究揭示了EGFRvIII 突变型胶质母细胞瘤(GBM)通过ERK/c-Fos信号通路上调MDK表达，激活巨噬细胞表面LRP1受体并诱导M2型极化，进而分泌免疫抑制因子CXCL1促进肿瘤恶性进展的分子机制。该发现为EGFRvIII 阳性GBM的精准免疫治疗提供了新靶点。

　　

胶质母细胞瘤(GBM)作为最具侵袭性的原发性脑肿瘤，其治疗困境主要源于高度异质性和免疫抑制性微环境。尽管免疫治疗在多种癌症中取得突破，但GBM中EGFRv^III
突变（最常见EGFR变异体）如何重塑肿瘤微环境仍是未解之谜。安徽医科大学第一附属医院的研究团队通过多组学分析结合功能实验，首次揭示EGFRv^III
阳性GBM通过"c-Fos-MDK-LRP1"分子轴驱动免疫逃逸的新机制，相关成果发表于《Cell Death and Disease》。

研究采用单细胞RNA测序(scRNA-seq)分析临床样本，发现EGFRv^III
(+)GBM中M2型巨噬细胞占比高达19.39%（EGFRv^III
(-)组仅6.78%）。通过构建颅内小鼠模型、Transwell共培养系统和MDK抑制剂(iMDK)干预实验，结合TCGA/CGGA数据库挖掘，团队系统阐明了EGFRv^III
→ERK/c-Fos→MDK→LRP1→CXCL1的级联调控网络。

主要技术方法

1. 临床样本分析：整合TCGA、CGGA和Rembrandt数据库，结合85例中国患者组织微阵列
2. 单细胞测序：分析16,028个细胞，鉴定7种细胞亚群
3. 分子互作验证：染色质免疫沉淀(ChIP)证实c-Fos结合MDK启动子，Co-IP验证MDK-LRP1互作
4. 动物模型：GL261-luc颅内移植模型联合活体成像监测
5. 免疫微环境检测：流式细胞术分析M1/M2巨噬细胞、Treg等免疫细胞亚群

EGFRv^III
突变与免疫微环境特征
单细胞分析显示EGFRv^III
(+)GBM中M2型巨噬细胞显著富集（图1）。组织微阵列证实MDK和M2标记物CD206在EGFRv^III
(+)组高表达（图2），而MDK分泌水平在EGFRv^III
突变细胞系中升高3-5倍（图2D）。

ERK/c-Fos-MDK调控轴
转录组测序发现MAPK通路激活（图3B），ChIP实验验证c-Fos直接结合MDK启动子区"TGTGACTCAGT"序列（图4H-J）。敲低c-Fos可使MDK表达降低60%（图4C-D），证实该通路的核心调控作用。

MDK-LRP1驱动M2极化
Co-IP显示GBM分泌的MDK与巨噬细胞LRP1结合（图5A），诱导CD163/CD206表达（图5B）。scRNA-seq揭示MDK-NCL/PTPRZ1/LRP1是主要配体-受体对（图S5）。

CXCL1的促瘤反馈
MDK敲除使巨噬细胞CXCL1分泌减少70%（图S6）。共培养实验证明CXCL1促进GBM细胞迁移（图S7），形成"肿瘤-巨噬细胞"恶性循环。

靶向干预效果
颅内模型显示MDK过表达使肿瘤体积增大2倍，而iMDK处理组生存期延长40%（图6B-C）。流式检测证实iMDK使M2巨噬细胞比例从32%降至15%（图6D）。

该研究首次阐明EGFRv^III
阳性GBM通过细胞自主（c-Fos-MDK）和非自主（MDK-LRP1-CXCL1）双重机制塑造免疫抑制微环境。临床意义在于：

1. 提出MDK作为EGFRv^III
   亚型特异性生物标志物
2. 揭示iMDK联合免疫治疗的潜在价值
3. 为克服GBM免疫治疗耐药性提供新策略

值得注意的是，相较于CSF-1R抑制剂临床疗效有限的问题，靶向MDK可同时阻断肿瘤细胞内在信号（ERK/c-Fos）和外在免疫调节（M2极化），这种双管齐下的策略可能产生更持久的治疗效果。研究团队建议未来探索MDK抑制剂与PD-1/CTLA-4抑制剂的联合方案，以破解EGFRv^III
阳性GBM的治疗困局。