Olink蛋白质组学揭示TNFRSF9作为腹主动脉瘤新型炎症标志物的诊断价值

本研究通过Olink蛋白质组学技术，首次发现TNFRSF9与IL-6在腹主动脉瘤(AAA)患者血清中显著共表达，结合动物模型验证其作为诊断标志物的潜力。研究揭示了TNFRSF9通过T细胞介导的炎症反应参与AAA发病的新机制，为这一缺乏有效药物治疗的疾病提供了新的诊断靶点和治疗方向。

　　

腹主动脉瘤(Abdominal Aortic Aneurysm, AAA)被称为人体内的"沉默炸弹"，这种血管壁异常扩张的疾病在破裂前往往没有明显症状，但一旦破裂死亡率高达80%-90%。目前临床诊断主要依赖影像学检查，缺乏有效的血液标志物，药物治疗更是空白。这种困境背后，是科学家们对AAA发病机制认知的不足——尽管已知慢性炎症是关键驱动因素，但具体哪些炎症因子起主导作用仍不清楚。

山西医科大学第二医院的研究团队在《iScience》发表的最新研究中，采用Olink邻近延伸检测(Proximity Extension Assay, PEA)技术对28例临床样本（18例AAA患者vs 10例健康人）进行92种炎症相关蛋白筛查，结合GSE183464转录组数据和动物实验，首次将肿瘤坏死因子受体超家族成员9(TNFRSF9)鉴定为AAA的新型诊断标志物。研究发现TNFRSF9与经典炎症因子IL-6的组合诊断模型曲线下面积(AUC)高达0.95，并通过单细胞测序揭示TNFRSF9主要富集于AAA组织中的T细胞，为理解AAA的免疫调控机制开辟了新视角。

关键技术包括：1）Olink PEA技术检测血清炎症蛋白谱；2）LASSO回归筛选特征蛋白；3）ELISA验证临床样本标志物表达；4）弹性蛋白酶诱导的小鼠AAA模型；5）单细胞RNA测序分析组织细胞亚群。

Olink蛋白质组学揭示血清炎症特征
研究团队通过高灵敏度的Olink炎症面板检测，在AAA患者中发现38个差异表达蛋白(DEPs)，其中26个上调（如IL-6、CXCL10）、12个下调。GO分析显示这些蛋白显著富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用通路和JAK-STAT信号通路。

TNFRSF9与IL-6的协同诊断价值
LASSO回归筛选出的13个特征蛋白与GSE183464转录组数据交叉验证，锁定TNFRSF9和IL-6在mRNA和蛋白水平均显著上调。ROC分析显示两者联合诊断效能显著优于单一指标（Olink AUC=0.9056；ELISA AUC=0.95）。

动物模型验证TNFRSF9作用机制
在弹性蛋白酶+BAPN诱导的小鼠AAA模型中，血清TNFRSF9水平较对照组升高3.2倍（p<0.01）。免疫组化和Western blot证实其在主动脉壁表达增加，单细胞测序显示Tnfrsf9主要富集于病变组织的T细胞亚群。

这项研究首次建立TNFRSF9与AAA的关联，其重要意义体现在三方面：1）提供新型血清诊断组合，弥补影像学检查的局限性；2）揭示T细胞通过TNFRSF9参与血管壁炎症的新机制；3）为开发靶向免疫调节疗法提供理论依据。值得注意的是，虽然TNFRSF9在肿瘤免疫治疗领域已被广泛研究，但其在心血管疾病中的作用仍是全新发现。研究也存在样本量较小、未纳入其他血管疾病对照等局限，未来需要通过多中心队列验证这一标志物的特异性。

从临床转化角度看，这种基于Olink技术的标志物筛选策略，为其他缺乏诊断标志物的疾病研究提供了范式。特别是TNFRSF9作为可溶性受体，可能比细胞因子更稳定，更适合临床检测。该研究不仅为AAA早期筛查带来希望，其发现的炎症网络更为靶向治疗研发指明方向——或许未来通过阻断TNFRSF9信号通路，就能遏制AAA的致命性进展。