小檗碱通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路缓解RSV诱导的儿童细支气管炎及肺纤维化

本研究揭示小檗碱（BBR）通过靶向HMGB1/TLR4/NF-κB通路，显著抑制呼吸道合胞病毒（RSV）复制，并减轻肺部炎症、细胞焦亡（pyroptosis）、上皮-间质转化（EMT）及纤维化，为RSV诱导的儿童细支气管炎（PB）提供新型治疗策略。

　　

Berberine抑制RSV复制及HMGB1表达

小檗碱（Berberine, BBR）作为天然异喹啉生物碱，展现出广谱抗病毒活性。研究通过建立RSV感染BEAS-2B细胞模型（MOI=1，72小时），发现BBR（1 μM）显著降低RSV mRNA水平及病毒滴度（Plaque assay），同时下调高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的转录与蛋白表达（Western blot）。电子显微镜观察显示，BBR可缓解RSV诱导的线粒体肿胀和染色质凝聚等细胞损伤。

靶向HMGB1/TLR4/NF-κB通路调控炎症与焦亡

通过HMGB1过表达（OE-HMGB1）和TLR4抑制剂（TAK-242）干预实验，证实BBR通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻炎症反应。Western blot显示BBR降低TLR4、磷酸化IκBα（p-IκBα）和磷酸化p65（p-p65）表达，而OE-HMGB1逆转此效应。流式细胞术检测发现BBR降低RSV诱导的细胞凋亡率（Annexin V-FITC/PI双染），同时ELISA检测显示IL-1β、IL-18、IL-33和TNF-α分泌减少。焦亡标志物NLRP3、ASC、cleaved caspase-1及GSDMD-N的表达亦被BBR显著抑制。

抑制EMT与纤维化进程

在EMT调控方面，BBR上调上皮标志物E-cadherin，下调间质标志物N-cadherin和转录因子Snail（Western blot）。纤维化相关基因Col1A1、α-SMA、fibronectin和ACTA2的mRNA水平（qRT-PCR）及蛋白表达（免疫荧光）均被BBR抑制，且TLR4抑制剂可增强此作用。

动物模型验证治疗潜力

RSV感染BALB/c小鼠模型（6.8×10⁶
PFU鼻内接种）中，BBR（10-30 mg/kg）剂量依赖性改善肺组织病理损伤（HE染色），降低HMGB1和NLRP3表达（IHC）。血清ELISA显示BBR减少炎症因子和纤维化标志物，Western blot进一步证实其对NF-κB通路、焦亡及EMT相关蛋白的调控作用与体外实验一致。

讨论与展望

研究首次阐明BBR通过HMGB1/TLR4/NF-κB轴多靶点干预RSV诱导的PB，涵盖病毒复制、炎症、焦亡、EMT和纤维化等关键病理环节。其机制可能涉及BBR直接抑制RSV复制，间接下调HMGB1表达，从而阻断下游信号级联反应。该发现为开发RSV相关儿童呼吸道疾病的天然药物疗法提供了实验依据，未来需进一步探索BBR的临床转化潜力及与其他抗病毒药物的协同效应。