血液肿瘤负荷(BTL)：联合生物标志物提升可评估患者比例及治疗靶点检测可靠性

为解决循环肿瘤细胞(CTC)和肿瘤源性细胞外囊泡(tdEV)单独检测时患者可评估率低的问题，研究者创新性提出血液肿瘤负荷(BTL)概念，通过整合CTC与tdEV数据形成0-1标准化评分。在98例转移性乳腺癌(mBC)和157例去势抵抗性前列腺癌(CRPC)患者中验证显示：BTL将HER2阳性评估率从35%提升至78%，且对CRPC患者治疗反应的预测风险比(HR)达3.37，显著优于单一标志物。该研究为肿瘤液体活检提供了更可靠的动态监测工具。

　　

在肿瘤精准医疗时代，液体活检技术正逐步改变临床实践。然而，作为重要生物标志物的循环肿瘤细胞(CTC)因检出率低（多数患者<5个/7.5ml血液），导致近65%转移性乳腺癌患者无法获得可靠的HER2表达评估。与此同时，肿瘤源性细胞外囊泡(tdEV)虽数量较CTC高一个数量级且与预后相关，但其单独应用的临床价值尚未明确。如何整合这些互补性标志物提升临床效用，成为亟待解决的科学问题。

为解决这一难题，研究人员创新性提出"血液肿瘤负荷"(Blood Tumor Load, BTL)概念，通过数学建模将CTC和tdEV计数整合为0-1标准化评分。研究团队利用ACCEPT开源软件(v1.1)对来自98例mBC和157例CRPC患者的CellSearch图像数据集进行重新分析，采用多参数线性门控策略识别CTC（CK+EpCAM+DAPI+CD45-）和tdEV（CK+EpCAM+DAPI-CD45-）。关键技术包括：1）基于log-logistic函数的量化转换模型；2）HER2表达分级算法（设定+、++、+++三个荧光强度阈值）；3）Cox比例风险模型评估预后价值。

血液肿瘤负荷的构建验证
通过优化设计的计算公式，BTL成功将CTC和tdEV的频数分布（mBC患者中tdEV中位数158个 vs CTC中位数4个）转化为统一标度。在mBC队列中，BTL使可评估HER2状态的患者比例从传统CTC阈值法的35%显著提升至78%，仅1例患者因零检出无法评估。

HER2表达评估突破
创新性地提出"HER2阳性分数"算法，通过加权整合CTC与tdEV的HER2-FITC信号（CTC权重随数量增加而提高）。当CTC>10时，CTC与tdEV的HER2表达相关性达R²
=0.61，而低CTC样本中相关性仅0.19，证实BTL可显著提升低负荷患者的评估可靠性。

CRPC治疗监测价值
在157例CRPC患者中，BTL基线水平（中位数0.58）与随访3.8周后的变化量呈现显著治疗响应梯度：45%患者BTL降低（Δ<-0.125），9%升高（Δ>0.125）。值得注意的是，BTL的预后预测效能显著优于单一标志物，其基线HR值达3.37（95%CI 2.33-4.88），较CTC(HR 1.86)和tdEV(HR 2.59)提高81%和30%。

这项发表于《ESMO Open》的研究具有三重里程碑意义：首先，BTL首次实现CTC与tdEV的定量整合，突破传统液体活检的样本限制；其次，提出的HER2动态评估框架为靶向治疗筛选提供新范式；最后，建立的标准化响应阈值（ΔBTL=±0.125）使治疗监测更具可操作性。值得注意的是，研究者特别指出当前BTL阈值需在前瞻性临床试验中验证，尤其需明确HER2表达分数与抗体偶联药物疗效的定量关系。未来通过纳入ctDNA等标志物，或可进一步拓展BTL在微小残留病灶检测中的应用前景。