典型有机磷酸酯阻燃剂TCEP与TNBP通过GPER1/ERK1/2信号通路诱导GT1-7细胞DNA损伤的机制研究

本研究针对有机磷酸酯阻燃剂（OPEs）的遗传毒性机制不明问题，通过GT1-7细胞模型揭示TCEP和TNBP通过激活GPER1/ERK1/2信号通路诱导DNA双链断裂（DSBs），上调ATM/γ-H2 AX表达，为OPEs的生殖神经毒性评估提供新靶点。

　　

有机磷酸酯阻燃剂（OPEs）作为多溴联苯醚（PBDEs）的替代品，已广泛存在于家居环境和人体样本中。近年研究发现，部分OPEs具有雌激素活性，但其遗传毒性机制尤其是通过膜受体GPER1的调控作用尚不明确。其中，氯化物TCEP和烷基化合物TNBP作为典型代表，在室内装饰材料中检出率持续攀升，可能通过干扰雌激素信号通路诱发DNA损伤，威胁生殖与神经健康。

上海市公共卫生系统三年行动计划支持的研究团队在《Toxicology》发表论文，采用GT1-7小鼠下丘脑细胞系（同时表达核受体ERα和膜受体GPER1），通过MTT法检测细胞活力、DCFH-DA探针测定ROS水平、彗星实验评估DNA断裂，结合qPCR和Western blot分析DNA损伤修复（DDR）相关基因及蛋白表达，并利用GPER1抑制剂G15和ERK1/2抑制剂U0126验证信号通路作用。

Effects on cell viability
研究发现，25-200 μM TCEP和10-100 μM TNBP呈浓度依赖性抑制GT1-7细胞活力，但存活率均维持在50%以上，为后续机制研究提供安全浓度范围。

ROS generation and DNA damage
高浓度暴露组（TCEP 50 μM、TNBP 10 μM）显著提升细胞内ROS水平。彗星实验显示，所有测试浓度均增加尾长、尾DNA百分比（Tail DNA%）和橄榄尾矩（OTM），证实DNA链断裂发生。

Molecular mechanisms
TCEP/TNBP上调DNA双链断裂标志蛋白ATM和γ-H₂
AX表达，并激活GPER1/ERK1/2通路。抑制剂实验表明，阻断该通路可显著降低DDR相关基因（如BRCA1、RAD51）表达和DNA损伤程度。

Discussion and conclusions
研究首次阐明氯化TCEP比烷基TNBP具有更强遗传毒性，其差异可能与氯代基团增强氧化应激有关。GPER1/ERK1/2通路的激活是OPEs诱导DNA损伤的关键机制，这一发现为评估OPEs的神经内分泌干扰效应提供了新型生物标志物。该成果对制定阻燃剂使用安全阈值具有重要指导价值，特别为易感人群（如孕妇、儿童）的环境暴露风险评估提供理论依据。