基因组图谱预测BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤克隆演变及预后的创新研究

本研究针对BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤（MPN）的克隆演化和预后预测难题，通过对1004例患者进行基因组测序和临床分析，揭示了JAK2、ASXL1等高频突变与疾病表型的关联，构建了包含U2AF1等独立风险因子的预测模型。该研究为MPN精准诊疗提供了分子标志物和新型风险评估工具，具有重要临床转化价值。

　　

骨髓增殖性肿瘤（MPN）是一组起源于造血干细胞的克隆性疾病，其中BCR-ABL阴性类型包括真性红细胞增多症（PV）、原发性血小板增多症（ET）和原发性骨髓纤维化（PMF）等。尽管JAK2、CALR和MPL等驱动突变已被明确，但共存突变对疾病进展和预后的影响仍不清楚。随着二代测序技术的普及，越来越多的证据表明，非驱动突变在MPN的异质性和恶性转化中扮演关键角色。然而，目前缺乏大样本研究系统揭示这些突变与临床特征的关联，更缺乏有效的预后预测工具。

山东大学齐鲁医院血液病团队在《Translational Oncology》发表了针对这一问题的里程碑式研究。研究人员对1004例初诊BCR-ABL阴性MPN患者进行了系统性分析，采用38基因panel的靶向测序技术（检测灵敏度1% VAF），结合LASSO回归和Cox模型构建了新型预测工具。研究队列涵盖PV（216例）、ET（478例）、PMF（177例）和未分类MPN（MPN-U，133例），通过长达261个月的随访，揭示了基因组特征与临床预后的深层关联。

主要技术方法包括：1）基于ICC 2022诊断标准的多中心患者招募；2）骨髓/外周血样本的靶向基因测序（Novaseq平台，2500×深度）；3）变异等位基因频率（VAF）定量分析；4）LASSO回归筛选预后相关基因；5）构建整合临床和分子特征的列线图预测模型。

研究结果：

1. 临床特征分析：PMF患者表现出最差的临床指标，包括最高乳酸脱氢酶（LDH，503.5 U/L）、最大脾肿大比例（70.5%）和最低血红蛋白（94 g/L），而MPN-U患者血小板计数最高（470×10⁹
   /L）且血栓事件频发。

2. 突变谱特征：JAK2 V617F（81.6%）、ASXL1（22.8%）和TET2（14.6%）是前三位高频突变。PMF患者伴随突变数量显著多于其他亚型（74%患者≥2个突变），且EZH2与ETV6突变呈正相关（r=0.23）。三重阴性（TN）患者中NPM1突变率显著高于正常人群（11.04% vs 0.64%，p=0.0076）。

3. 预后关联：PMF患者5年生存率最低（p<0.0001），JAK2野生型（p=0.0037）和高症状负荷（p<0.0001）提示不良预后。U2AF1突变是独立死亡风险因子，而NF1和ZRSR2突变与AML转化相关。

4. 克隆演化：追踪发现NF1/ZRSR2克隆扩增伴随PV向AML转化，PPM1D突变克隆出现则与PMF进展为MDS相关。

5. 预测模型：基于8个基因（JAK2、CALR、U2AF1等）的风险评分模型和整合临床指标的列线图，其5年生存预测AUC达0.821。

结论与意义：
该研究首次在大型队列中系统描绘了BCR-ABL阴性MPN的基因组全景，揭示了三重阴性患者特有的NPM1突变模式，以及U2AF1等新型预后标志物。所构建的预测工具突破了传统临床分期的局限，将分子特征与血小板计数（PLT）、症状负荷等指标有机结合，为个体化治疗决策提供了量化依据。特别值得注意的是，发现JAK2 V617F高突变负荷（VAF≥70%）在ET患者中反而预示更好生存（p=0.0143），这一反直觉现象提示需要重新审视突变负荷的临床意义。

研究还揭示了MPN向AML/MDS转化过程中的关键分子事件：ZRSR2和NF1突变协同驱动白血病转化，而PPM1D突变克隆扩增与MDS进展相关，这些发现为开发干预策略提供了新靶点。尽管存在随访样本量有限等局限，但该研究建立的预测体系已显示出优越的临床适用性，未来通过多中心验证有望改写MPN诊疗指南。