RIP2/NF-κB/PD-L1信号通路通过诱导胶质母细胞瘤自噬促进替莫唑胺耐药机制研究

本研究针对胶质母细胞瘤(GBM)替莫唑胺(TMZ)耐药难题，揭示了RIP2通过NF-κB/PD-L1信号轴激活AMPK依赖的自噬通路新机制。研究人员通过TCGA数据分析、体外细胞实验和体内异种移植模型，证实抑制该通路可逆转TMZ耐药，为GBM靶向治疗提供新策略。

　　

胶质母细胞瘤(GBM)作为最具侵袭性的脑肿瘤，其治疗面临替莫唑胺(TMZ)耐药的严峻挑战。尽管TMZ能有效穿透血脑屏障，但患者中位生存期仅15个月，5年生存率不足36%。现有研究表明自噬与化疗耐药密切相关，但受体相互作用蛋白2(RIP2)在GBM中的调控机制仍是未解之谜。

河北医科大学第二医院的研究团队在《Translational Oncology》发表重要成果，通过TCGA数据库分析、体外细胞实验(CCK-8、流式细胞术、Western blot)和裸鼠异种移植模型，首次阐明RIP2通过NF-κB/PD-L1/AMPK信号轴诱导自噬进而介导TMZ耐药的全新机制。

主要技术方法包括：1)TCGA数据库分析GBM组织RIP2表达；2)重组RIP2蛋白(rRIP2)处理和质粒转染构建过表达模型；3)CCK-8检测细胞活力；4)Western blot分析信号通路蛋白；5)免疫荧光观察LC3B分布；6)流式细胞术检测凋亡；7)裸鼠异种移植实验验证体内药效。

【RIP2诱导GBM化疗耐药和PD-L1表达】
TCGA数据显示GBM中RIP2 mRNA显著上调。体外实验证实rRIP2处理和过表达均能增强四种GBM细胞系对TMZ的耐药性，其中SNB19细胞最显著。异种移植模型显示RIP2过表达肿瘤TMZ敏感性降低，且PD-L1蛋白表达上调。

【RIP2通过AMPK激活诱导GBM细胞自噬】
Western blot显示rRIP2和过表达均上调p-AMPK和LC3B-II，下调p62。免疫荧光观察到LC3B从弥散转为点状分布。自噬抑制剂氯喹(Chl)可逆转p62下调，证实RIP2通过AMPK激活自噬流。

【RIP2通过PD-L1调控自噬】
PD-L1在RIP2过表达细胞中显著上调。siRNA沉默PD-L1可抑制RIP2诱导的自噬相关蛋白变化，表明PD-L1是RIP2诱导自噬的关键介质。

【NF-κB信号通路的核心作用】
RIP2过表达激活NF-κB通路(p65磷酸化增加，IκBα降解)。NF-κB抑制剂JSH-23能抑制PD-L1上调，在体内外实验中均能逆转TMZ耐药，证实NF-κB是RIP2/PD-L1轴的上游调控者。

【靶向干预的逆转效应】
体内实验显示JSH-23和Chl处理使异种移植瘤T/C值从96.4%分别降至46.2%和38.2%，Ki67表达显著降低，证明抑制NF-κB或自噬可有效恢复TMZ敏感性。

该研究首次绘制出RIP2/NF-κB/PD-L1→AMPK→自噬→TMZ耐药的完整信号通路图，突破性地提出三重干预策略：靶向RIP2本身、阻断NF-κB信号或抑制自噬过程。这不仅为理解GBM耐药机制提供新视角，更为临床开发联合治疗方案奠定理论基础。特别值得注意的是，PD-L1作为免疫检查点分子与自噬的交叉调控，为免疫治疗与化疗的协同应用开辟了新思路。研究采用的SNB19细胞模型对TMZ高度敏感，使其成为研究耐药机制的理想工具，而裸鼠模型的数据转化价值进一步强化了临床指导意义。这些发现对改善GBM患者预后具有重要转化价值。