HPV18 E6癌蛋白通过调控NF-κB/Wnt通路抑制细胞凋亡的果蝇模型研究

本研究针对高危型HPV18 E6癌蛋白抑制细胞凋亡的分子机制展开探索，利用果蝇模型揭示E6通过下调NF-κB同源因子Dorsal/Dif和Wingless（Wg）表达阻断凋亡的新机制。研究发现Dorsal促进自噬而Dif诱导坏死，且E6无法抑制后者，为HPV相关癌症治疗提供了靶向NF-κB通路干预的新思路。

　　

高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染每年导致超过30万例癌症死亡，其中E6和E7癌蛋白的持续表达是癌症发展的关键。尽管已知E6通过阻断程序性细胞死亡促进肿瘤发生，但其抗凋亡机制尚未完全阐明。这一科学问题的破解对开发靶向治疗至关重要。

来自国外研究机构的研究团队在《Tumour Virus Research》发表论文，创新性地利用果蝇HPV18E6/人UBE3A致病模型，揭示了E6通过调控NF-κB和Wnt通路抑制凋亡的保守机制。研究发现果蝇中NF-κB同源因子Dorsal和Dif具有促凋亡功能，能诱导Wingless（Wg，人Wnt同源物）表达进而触发凋亡。E6通过下调Wg、Dorsal和Dif表达抑制凋亡，但无法阻断Dif诱导的坏死性死亡。这一发现为干预HPV感染细胞的永生化提供了新靶点。

研究采用GMR-Gal4驱动转基因表达系统，通过免疫荧光染色检测凋亡标志物cleaved Dcp-1和Wg蛋白定位，结合RT-PCR分析基因转录水平。利用LysoTracker和Atg8a-GFP标记自噬体，Propidium iodide（PI）染色鉴定坏死细胞，并通过遗传互作实验验证NF-κB因子与E6的功能关系。

3.1 E6协同UBE3A阻断果蝇眼周边凋亡
研究发现E6+hUBE3A共表达使果蝇眼中cleaved Dcp-1阳性细胞显著减少，证实E6抗凋亡功能在果蝇中保守存在。

3.2 E6通过降低Wingless蛋白水平抑制凋亡
免疫荧光显示E6+hUBE3A使眼周边Wg蛋白环消失，但RT-PCR证实Wg转录水平未受影响，提示E6通过翻译后机制调控Wg。

3.3 Dorsal/Dif与E6存在功能互作
遗传筛选发现NF-κB因子Dorsal和Dif（非Relish）过表达可逆转E6+hUBE3A导致的眼增大表型，暗示其可能干扰E6功能。

3.4 Dorsal/Dif通过诱导Wg促凋亡
过表达Dorsal或Dif导致Wg在眼特定区域异位表达并增强凋亡，而E6能抑制这一过程。原位杂交证实内源Dorsal/Dif在眼周边共定位。

3.5 E6下调Dorsal/Dif转录水平
RT-PCR显示E6+hUBEE3A显著降低Dorsal和Dif转录本，但补偿性过表达仍无法恢复Wg蛋白，表明E6对Wg的调控独立于NF-κB转录调控。

3.6 Dorsal促自噬而Dif诱坏死
研究发现Dorsal增加LysoTracker⁺
自噬体，而Dif抑制自噬并诱导PI⁺
坏死。E6能阻断Dorsal/Dif促凋亡功能，但对Dif诱导的坏死无效。

该研究首次在果蝇模型中系统阐明E6通过NF-κB/Wnt轴抑制凋亡的分子路径，揭示Dorsal和Dif在凋亡、自噬和坏死中的差异化调控作用。特别重要的是，发现E6无法抑制Dif介导的坏死性死亡，这为靶向NF-κB通路（尤其是其人类同源物RELA）干预HPV致癌过程提供了理论依据。研究提出的"通过激活NF-κB依赖性坏死克服E6介导的细胞死亡逃逸"策略，为HPV相关癌症治疗开辟了新思路。