鼠李糖多糖修饰的外膜囊泡作为靶向A组链球菌的候选疫苗：针对化脓性链球菌和马链球菌亚种的研究

为解决A组链球菌（Strep A）感染导致的全球高死亡率及抗生素耐药性问题，研究人员开发了一种基于重组鼠李糖多糖（RhaPS）的外膜囊泡（OMV）疫苗。通过在小鼠和兔模型中验证其免疫原性，证实RhaPS-OMV可诱导特异性抗体识别多种Strep A血清型，并促进单细胞依赖性吞噬作用，为开发通用Strep A疫苗提供了新策略。

　　

A组链球菌（Strep A）是导致人类多种感染的重要病原体，每年造成超过50万人死亡。随着抗生素耐药性问题的加剧，开发通用疫苗成为迫切需求。Strep A的表面抗原——A组碳水化合物（GAC）因其高度保守性被视为理想靶点，但其GlcNAc侧链可能引发交叉反应抗体，限制了应用。为此，研究人员将目光转向GAC的鼠李糖多糖（RhaPS）骨架，通过重组技术将其展示于大肠杆菌外膜囊泡（OMV），探索其作为疫苗的潜力。

来自英国的研究团队在《Vaccine: X》发表的研究中，利用基因工程技术将化脓性链球菌和马链球菌亚种的RhaPS生物合成基因簇导入大肠杆菌，制备了RhaPS修饰的OMV（RhaPS-OMV）。通过流式细胞术、ELISA和免疫荧光显微镜等技术，验证了RhaPS-OMV在小鼠和兔模型中的免疫原性。结果显示，RhaPS-OMV诱导的抗体能特异性识别多种Strep A血清型，并通过单核细胞介导的吞噬作用清除细菌。此外，RhaPS-OMV刺激的脾细胞在再刺激后产生高水平的IL-17A，提示其可能激活细胞免疫应答。

主要技术方法
研究采用基因重组构建RhaPS-OMV生产菌株，通过超速离心纯化OMV；利用流式细胞术和ELISA分析抗体结合能力；通过THP-1单核细胞吞噬实验评估功能抗体效应；采用Western blot和纳米颗粒追踪技术验证抗原表达和囊泡特性。

研究结果

1. 重组RhaPS-OMV在脂质A上携带抗原
   Western blot证实RhaPS成功锚定于OMV，且与天然Strep A的RhaPS结构一致。

2. RhaPS-OMV刺激的抗体选择性结合RhaPS表位
   流式细胞术显示RhaPS-OMV免疫血清特异性识别表达RhaPS的大肠杆菌，几何平均荧光强度（gMFI）显著高于对照组。

3. RhaPS-OMV抗体识别多种Strep A血清型
   抗体对M1₅₄₄₈
   、M6等10种血清型均表现出结合能力，加入铝佐剂后效果增强。

4. RhaPS-OMV血清刺激IL-17A产生
   脾细胞再刺激实验显示IL-17A水平升高，提示Th17细胞免疫应答参与。

5. 兔血清抗体促进Strep A吞噬
   分离的IgG显著增强THP-1单核细胞对M1_UK
   等血清型的吞噬作用，证实功能保护性。

结论与意义
该研究首次证明重组RhaPS-OMV可诱导广谱抗体反应，覆盖化脓性链球菌和新兴的马链球菌亚种（SDSE_gac）。其无需化学修饰的生产优势，以及激活体液与细胞免疫的双重机制，为Strep A疫苗开发提供了新方向。未来需进一步评估体内保护效力及与现有候选疫苗的对比，推动其向临床转化。