重组神经氨酸酶联合嵌合HA灭活裂解疫苗增强小鼠对流感病毒的交叉保护作用

针对季节性流感疫苗对漂变毒株保护力不足的问题，研究人员通过将重组N2神经氨酸酶(rNA-N2-MPP)与基于嵌合HA(cHA)的灭活裂解疫苗联用，在小鼠模型中证实该策略可显著提升对异源H3N2病毒的交叉中和抗体水平及生存保护率(100%)，为开发广谱流感疫苗提供新思路。

　　

流感疫苗的广谱保护难题始终是公共卫生领域的重大挑战。当前季节性流感疫苗主要针对血凝素(HA)头部可变区，当流行株发生抗原漂变时保护效果急剧下降。更棘手的是，H3N2病毒因其快速变异特性常成为主要流行株。面对这一困局，靶向HA保守茎部结构域和神经氨酸酶(NA)的"双管齐下"策略逐渐成为研究热点。

美国西奈山伊坎医学院的研究团队在《Vaccine》发表创新性研究，通过将嵌合HA(cHA)灭活裂解疫苗与重组NA(rNA-N2-MPP)联用，成功在小鼠模型中实现对抗原差异显著(同源性仅89%)的异源H3N2病毒完全保护。该研究首次证实这种组合策略既能维持强效的HA茎部抗体反应，又可显著提升NA抗体的交叉反应广度。

关键技术方法包括：采用反向遗传学构建含异源HA头部(如H15、H4)和H3茎部的嵌合病毒；优化β-丙内酯灭活结合Triton X-100裂解的疫苗制备工艺；建立包含ELISA、神经氨酸酶抑制(NAI)实验的多维度免疫评价体系；通过致死剂量(20×LD₅₀
)异源病毒攻毒验证保护效果。

3.1 组合策略增强N2抗体交叉反应性
通过序贯免疫cH15/3_HK14
和cH4/3_HK14
裂解疫苗（均含CpG 1018佐剂）联合不同剂量rNA-N2-MPP(9-0.3μg)，发现高剂量组(9μg)对同源(N2 HK14)和异源(KS17、X-79及禽源N2)NA的IgG效价提升4-8倍，且不影响H3茎部抗体水平。NAI实验证实该组合对同源H6N2_HK14
病毒的抑制效价达1:1024，对同源性98.5%的H6N2_Singapore/16
毒株也呈现剂量依赖性提升。

3.2 NA补充显著提升保护效力
在模拟人类预存免疫的B-cH5/1病毒预免疫模型中，单独cHA疫苗组对异源X-79(H3N2)病毒存活率为80%，而补充9μg rNA-N2-MPP组实现100%存活，且平均体重损失降低62%。值得注意的是，X-79与疫苗株的HA/NA同源性均不足90%，凸显该策略对抗原差异毒株的突出保护优势。

该研究突破性地证明：cHA疫苗保留的NA抗原性与外源补充rNA具有协同效应；HA茎部与NA抗体的"双靶向"免疫不产生表位竞争；基于灭活疫苗平台的组合策略易于转化应用。这些发现为开发下一代广谱流感疫苗提供了重要范式，尤其对解决H3N2快速变异导致的疫苗失效问题具有临床转化价值。