犬类食物过敏中CD4+ CD8+ 双阳性T细胞的增殖特征及其诊断潜力探索

本研究针对犬类食物过敏(AFR)诊断难题，通过流式细胞术分析CD4+ CD8+ 双阳性T细胞(DP T)在AFR、非食物诱导特应性皮炎(NFICAD)和健康犬(HTY)中的增殖差异。发现DP T细胞在食物过敏犬中呈现更高增殖活性，但存在显著个体差异，虽不能作为特异性诊断标志，为理解犬类过敏免疫机制提供了新视角。

　　

在宠物医疗领域，犬类食物不良反应(AFR)正成为日益突出的健康问题。这种由特定食物成分引发的免疫介导超敏反应，常表现为皮肤瘙痒、胃肠道症状等，但当前诊断主要依赖耗时的食物排除法，缺乏可靠生物标志物。与此同时，CD4⁺
CD8⁺
双阳性T细胞(DP T)在人类过敏性疾病中显示出独特作用，但其在犬类过敏中的功能仍是未解之谜。

比利时根特大学的研究团队开展了一项开创性研究，首次系统评估了DP T细胞在犬类食物过敏中的特征。研究人员收集了28例AFR犬、8例NFICAD犬和8例健康对照犬的外周血样本，通过Ficoll密度梯度离心分离PBMCs（外周血单个核细胞），采用CellTrace Violet标记技术结合多色流式细胞术，定量分析了不同刺激条件下DP T细胞的增殖动态。特别值得注意的是，研究团队建立了严格的临床入组标准：AFR犬需通过8周食物排除试验和14天激发试验确诊，而NFICAD犬则需符合国际诊断标准并排除食物过敏因素。

研究结果揭示三个关键发现：首先，在未刺激状态下，健康犬的DP T细胞基线比例(7.18%)意外高于AFR犬(3.87%)，这提示静息状态DP T可能具有免疫调节功能。其次，食物过敏原刺激后，AFR组DP T细胞增殖显著强于NFICAD组(P=0.0119)，尤其在鸡肉、猪肉等常见过敏原刺激时差异明显。最后，当以健康犬增殖均值作为阈值时，该检测仅能识别28.57%的致敏原，且存在17.86%假阳性率，表明其诊断特异性不足。

在讨论环节，作者深入分析了DP T细胞的异质性可能带来的影响。既往研究显示犬DP T包含CD4^dim
CD8α^bright
、CD4^bright
CD8α^bright
等亚群，不同亚群可能具有截然不同的免疫功能。研究团队特别指出，虽然DP T细胞增殖与AFR存在关联，但个体差异大、过敏原特异性低等局限使其难以成为临床诊断工具。不过，该发现为理解犬类食物过敏的免疫机制开辟了新途径——DP T细胞可能通过分泌特定细胞因子或直接参与抗原提呈过程影响过敏进程。

这项发表在《Veterinary Immunology and Immunopathology》的研究具有多重意义：在理论层面，首次系统描绘了DP T细胞在犬类食物过敏中的动态特征；在临床层面，为开发新型免疫调节疗法提供了潜在靶点；在方法学层面，建立的流式检测方案为后续研究提供了技术框架。正如作者强调，未来需要结合单细胞测序等技术深入解析DP T细胞亚群功能，并扩大样本量验证其在各类过敏性疾病中的普适性规律。这项研究不仅填补了比较免疫学的重要空白，也为解决宠物临床诊断困境带来了曙光。