综述：通过定量聚合酶链反应对锥虫宿主进行分子检测的系统评价

本综述系统评价了实时定量PCR（qPCR）在克氏锥虫（Trypanosoma cruzi）动物宿主检测中的应用，涵盖2013-2024年PubMed文献，重点分析卫星DNA靶标（84.6%）、血液样本（57.7%）和TaqMan?探针（53.8%）等关键技术参数，为恰加斯病（Chagas disease）的动物宿主监测提供标准化建议。

　　

Abstract
动物宿主通过多种人畜共患途径显著促进克氏锥虫（Trypanosoma cruzi）传播，该寄生虫是恰加斯病（Chagas disease）的病原体。实时定量聚合酶链反应（qPCR）因其高灵敏度成为检测T. cruzi DNA的核心技术。本文通过系统检索2013-2024年PubMed数据库，聚焦qPCR在动物宿主检测中的方法学差异、优势与局限。值得注意的是，2024年相关研究激增，与恰加斯病病例增长趋势吻合。研究地域以流行国家为主，但美国、法国等非流行区亦有贡献。约半数研究针对家养宿主——这些物种在传播风险评估中具有哨兵意义。

Material and methods
文献检索采用双策略：策略1以"Trypanosoma cruzi" AND "qPCR" AND "animals"为关键词，初筛125篇文献；策略2补充"reservoir hosts"术语。最终纳入研究显示：84.6%采用卫星DNA靶标（因其对T. cruzi的高特异性），57.7%使用血液样本，53.8%选择TaqMan?探针体系。热循环参数、DNA模板与试剂浓度存在显著异质性。

Results
宿主在T. cruzi传播循环中发挥核心作用，主要通过媒介传播（如锥蝽吸血摄入循环锥鞭毛体）和动物源性传播（接触感染血液/分泌物）。qPCR已成功应用于食品基质检测（如Godoi等2017年研究）、献血者筛查（Cancino-Faure等2015年）等多场景。

Discussion
尽管阴性对照普遍采用，交叉反应测试仍较缺乏。建立标准化qPCR协议对完善T. cruzi传播循环监测至关重要。作者特别指出，卫星DNA靶标虽特异性优异，但需注意不同基因型间拷贝数差异可能影响定量准确性。

Author’s contribution
VKSB主导研究并参与撰稿，FRG负责课题设计与监督，DCM提供关键学术修正。研究获得巴西国家科技发展委员会（CNPq）资助（VKSB硕士奖学金130277/2025–8，DCM生产力奖学金PQ #314811/2021–4）。声明未使用AI生成内容，仅借助工具进行英语润色。