动物园圈养狐猴源多头绦虫野生型分离株的体外培养及其在抗蠕虫药物筛选中的应用研究

为解决动物园灵长类动物频发多头绦虫(Taenia crassiceps)感染且现有治疗药物疗效不足的问题，奥地利萨尔茨堡动物园与瑞士伯尔尼寄生虫学研究所合作，首次从死亡环尾狐猴(Lemur catta)皮肤病灶中分离培养出野生型T. crassiceps metacestodes（后尾蚴），并建立基于磷酸葡萄糖异构酶(PGI)释放和运动性检测的双重体外药效评价体系。研究发现吡喹酮(PZQ)对虫体结构破坏(29% PGI释放)和运动抑制效果显著优于苯并咪唑类药物(甲苯咪唑MBZ仅14% PGI释放)，为优化动物园灵长类寄生虫病治疗方案提供了重要实验依据。

　　

在动物园灵长类动物保护工作中，多头绦虫(Taenia crassiceps)感染正成为日益严峻的卫生挑战。这种以犬科动物为终宿主、啮齿类为中间宿主的寄生虫，意外感染狐猴等灵长类时会导致致命性囊尾蚴病。奥地利萨尔茨堡动物园曾发生多起狐猴猝死事件，尸检发现胸腔充满增殖性T. crassiceps metacestodes（后尾蚴）。尽管定期使用芬苯达唑(FBZ)预防，2022年仍有环尾狐猴死亡案例，凸显现有治疗方案的局限性。

为突破这一困境，萨尔茨堡动物园与瑞士伯尔尼寄生虫学研究所的科研团队开展了一项创新研究。他们从死亡狐猴皮肤病灶中分离出野生型T. crassiceps metacestodes，通过分子鉴定确认其与欧洲红狐源虫株100%同源。研究团队成功建立长期体外培养体系，使虫体在含大鼠肝癌细胞(RH)的DMEM培养基中存活逾一年，并观察到虫体从年轻空泡期到成熟囊尾蚴的形态演变。

研究采用两种关键技术：基于磷酸葡萄糖异构酶(PGI)释放的损伤标记检测，通过测量虫体破裂后释放的PGI酶活性量化药物损伤效果；以及自动化运动性分析系统，以2秒间隔拍摄虫体运动轨迹并通过图像处理算法定量分析。实验选取1周龄(年轻)和17周龄(老化)培养虫体，测试40 μM浓度下阿苯达唑(ABZ)、芬苯达唑(FBZ)、甲苯咪唑(MBZ)和吡喹酮(PZQ)的疗效。

研究结果显示：吡喹酮展现出最强的杀虫活性，12天 incubation（培养）后诱导29% PGI释放（相当于去垢剂Triton X-100对照组的损伤水平），并完全抑制虫体运动。苯并咪唑类药物整体效果较弱，其中MBZ表现最佳（14% PGI释放，运动性降低49%），而动物园常规使用的FBZ几乎无损伤作用（PGI释放0%，运动性反而增加87%）。值得注意的是，药物对年轻虫体的效果普遍优于老化虫体，提示临床治疗应针对早期感染。

在讨论部分，研究者指出该成果具有三重意义：首次建立动物园源T. crassiceps野生株的体外培养模型，为后续研究提供生物材料；验证PGI和运动性检测在绦虫药物筛选中的普适性，实现与棘球蚴等近缘物种的横向比较；临床层面建议动物园考虑将PZQ与MBZ联用替代现行FBZ单药方案。研究同时揭示苯并咪唑类对分化程度高的虫体效果有限，这可能与其在皮下组织分布不足有关。

该研究发表于《Veterinary Parasitology》，为濒危灵长类寄生虫病防治提供了重要工具。未来可通过测定半数抑制浓度(IC₅₀
)、探索药物组合或新型化合物，进一步优化治疗方案。随着气候变化可能扩大寄生虫分布范围，这类跨物种感染研究将愈发重要。