IFIT3通过调控TBK1-STAT1通路磷酸化增强先天免疫反应抑制猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染的机制研究

本研究针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染机制不明的问题，揭示了干扰素诱导蛋白IFIT3通过促进TBK1和STAT1磷酸化，激活I型干扰素(IFN-β)信号通路及干扰素刺激基因(ISGs)表达，从而抑制TGEV复制。该发现为冠状病毒先天免疫逃逸机制提供新见解，对开发抗病毒策略具有重要意义。

　　

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)是造成仔猪高死亡率的重要病原体，其致死率可达70%-100%，给养猪业带来巨大经济损失。尽管近年来发病率有所下降，但高毒力重组株的出现以及与犬猫冠状病毒的基因相似性，暗示其潜在的跨物种传播风险。在病毒与宿主的博弈中，先天免疫系统扮演着关键角色，其中I型干扰素(IFN)通路是抗病毒防御的第一道防线。然而，TGEV如何逃逸宿主免疫监视，以及宿主如何通过干扰素诱导蛋白(IFITs)进行反击，仍是未解之谜。

针对这一科学问题，中国的研究团队在《Virology》发表论文，系统研究了IFIT3在TGEV感染中的作用机制。研究采用IPEC-J2肠上皮细胞模型，结合基因过表达/敲降、免疫共沉淀(Co-IP)、TCID₅₀
病毒滴度测定等技术，发现TGEV感染可诱导IFIT3表达上调，而IFIT3通过直接结合TBK1和STAT1，促进其磷酸化，进而激活IFN-β信号通路和ISGs表达，最终抑制病毒复制。

TGEV感染诱导IFIT3表达
实验证实TGEV感染猪肠上皮细胞后，IFIT3 mRNA和蛋白水平显著升高，提示IFIT3可能是宿主对抗TGEV的重要效应分子。

IFIT3过表达抑制TGEV感染
构建pCDNA3.1-IFIT3-Myc-His重组质粒转染细胞后发现，IFIT3过表达使病毒滴度降低10倍，同时伴随TBK1和STAT1磷酸化水平升高，以及IFN-β、ISG15等效应分子表达增加。

IFIT3敲降削弱抗病毒反应
siRNA沉默IFIT3后，TGEV复制增强，TBK1/STAT1磷酸化和IFN信号通路活性显著降低，证实IFIT3是调控先天免疫的关键节点。

机制解析：IFIT3-TBK1-STAT1相互作用
免疫共沉淀揭示IFIT3通过其第二TPR结构域与TBK1、STAT1直接结合。使用JAK抑制剂阻断STAT1磷酸化后，IFIT3的抗病毒效应被逆转，证实JAK-STAT1通路是IFIT3发挥作用的核心途径。

这项研究首次阐明IFIT3通过"TBK1→STAT1→ISGs"级联反应抑制TGEV的分子机制，不仅拓展了对冠状病毒-宿主互作的认识，还为开发靶向IFIT3通路的抗病毒策略提供理论依据。值得注意的是，IFIT3在HBV、PRRSV、SARS-CoV-2等多种病毒感染中均发挥保护作用，提示其可能成为广谱抗病毒治疗的潜在靶点。研究团队特别指出，IFIT3的第二结构域是其抗TGEV功能的关键区域，这为后续药物设计提供了精确的分子靶标。该成果对应对冠状病毒跨种传播威胁具有重要预警价值。