不同参数针灸对关节炎大鼠镇痛效应与穴位ATP释放的机制研究

本研究针对针灸参数优化与镇痛机制不明确的问题，通过建立急性佐剂性关节炎（AA）大鼠模型，系统探究了手动针灸（MA）不同操作手法（标准MA、提插法、浅刺法）和电针（EA）不同频率（2 Hz/100 Hz/2-100 Hz）对ST36穴位细胞外ATP（inters. ATP）释放及镇痛效果的影响。研究发现标准MA和提插法显著提升ATP水平（P<0.001）并产生镇痛效应，浅刺法虽能镇痛但ATP释放较少；100 Hz EA通过ATP水解依赖途径缓解疼痛，而2 Hz EA则可能通过非嘌呤能信号通路发挥作用。该研究为针灸参数标准化提供了分子生物学依据，发表于《World Journal of Acupuncture - Moxibustion》。

　　

针灸作为传统医学的重要组成部分，其镇痛机制一直是研究热点。尽管既往研究表明穴位局部腺苷三磷酸（ATP）释放与手动针灸（MA）镇痛效果相关，但不同操作手法和电针（EA）参数如何影响这一过程仍不明确。尤其在临床实践中，针灸师对提插、捻转等手法选择多依赖经验，而电针频率（如2 Hz与100 Hz）的疗效差异也缺乏机制解释。这些问题限制了针灸疗法的标准化应用。

针对上述问题，上海中医药大学的研究团队在《World Journal of Acupuncture - Moxibustion》发表论文，通过建立急性佐剂性关节炎（AA）大鼠模型，系统比较了不同MA手法和EA频率对ST36穴位ATP释放及镇痛效果的影响。研究采用经典行为学测试（热板法测PWL、电子Von Frey测LWT）评估痛阈，结合微透析技术动态监测穴位局部细胞外ATP（inters. ATP）浓度，并利用ARL67156（ecto-ATP酶抑制剂）阻断ATP水解以验证其必要性。

3.1 关节炎大鼠ST36的敏化特征
AA模型成功诱导ST36穴位机械痛觉超敏（LWT降低P<0.001），且标准MA刺激后穴位ATP峰值浓度（7/10案例在5分钟达峰）和总量均显著高于正常大鼠（P<0.05）。这表明炎症状态下穴位对机械刺激的敏感性增强，为"穴位敏化"理论提供了实验依据。

3.2 MA操作手法的影响
标准MA（捻转+提插）和单纯提插法均显著缓解热痛敏（PWL提升P<0.001），而假针刺（深刺不操作）无效。值得注意的是，仅穿透皮肤层的浅刺法也能镇痛（P<0.05），但ATP释放量远低于标准MA。使用ARL67156阻断ATP水解后，标准MA的镇痛效果被显著抑制（P<0.01），证实其依赖ATP-腺苷转化通路；而浅刺法的镇痛可能通过直接激活皮肤机械感受器实现。

3.3 EA频率的差异化机制
2 Hz、2-100 Hz和100 Hz EA均能镇痛（P<0.05），但仅100 Hz组显著提升ATP水平（P<0.01）。阻断ATP水解后，100 Hz EA的镇痛作用减弱（P<0.05），而2 Hz EA不受影响，提示高频EA通过肌肉收缩介导ATP释放，低频EA则可能激活内源性阿片系统。

讨论与意义
该研究首次揭示：1）标准MA通过机械力触发组织ATP释放，经ecto-ATP酶水解为腺苷激活A1受体（嘌呤能信号通路）产生镇痛；2）浅刺法可能通过表皮角质细胞（keratinocytes）的P2?×?4受体直接激活感觉神经；3）不同频率EA存在"频率-机制"对应关系，100 Hz依赖ATP通路，2 Hz则涉及非嘌呤能机制。这些发现为针灸"手法-参数-疗效"的精准匹配提供了分子靶点，尤其对临床选择浅刺（适合皮肤敏感患者）或高频电针（针对深层肌肉病变）具有指导价值。未来研究需进一步解析浅刺法涉及的皮肤特异性受体及低频EA的神经肽调控网络。