SPD基因缺失通过Muc5ac/Muc5b失衡加剧卵清蛋白诱导的咽鼓管过敏反应及功能损伤

本研究针对过敏反应与咽鼓管功能障碍(ETD)的机制不明问题，通过构建SPD-/- 小鼠模型，结合OVA致敏和鼻腔刺激，首次揭示SPD缺失会加剧ET黏膜嗜酸性粒细胞浸润、黏液分泌异常（Muc5ac/Muc5b失衡）及功能损伤（ACNP/POP异常），而外源性SPD治疗可逆转上述病理改变。该研究为过敏性ETD的靶向治疗提供了新策略，发表于《World Allergy Organization Journal》。

　　

咽鼓管（Eustachian tube, ET）作为连接中耳与鼻咽的关键通道，其功能障碍（ETD）是导致渗出性中耳炎（OME）等疾病的常见原因。尽管临床观察发现过敏性疾病患者更易并发ETD，但具体机制始终成谜。表面活性蛋白D（Surfactant protein D, SPD）作为一种兼具免疫调节和表面活性功能的C型凝集素，在肺部过敏性疾病中已被证实具有保护作用，但其在ET这一特殊解剖部位的免疫防御角色却鲜有研究。

华中科技大学的研究团队通过构建SPD基因敲除（SPD^-/-

关键技术方法
研究采用SPD^-/-
（C57BL/6N背景）与野生型（WT）小鼠，通过腹腔注射OVA/氢氧化铝佐剂致敏联合鼻腔OVA激发建立过敏性ETD模型。运用组织病理学（H&E染色）、免疫荧光/组化（检测Muc5ac/Muc5b）、小动物活体成像（评估黏液纤毛清除功能MCC）及定制化ET压力测试系统（测量POP/ACNP）等多维度技术，结合外源性SPD干预实验，全面解析SPD的调控机制。

研究结果

表型差异揭示SPD缺失加剧过敏反应
OVA致敏后，SPD^-/-
小鼠较WT表现出更频繁的喷嚏（增加38%）和更高血清IgE水平（P<0.001）。ET组织学显示：SPD^-/-
-OVA组嗜酸性粒细胞浸润数量在ET横断面和咽口处分别比WT-OVA组增加2.1倍和1.8倍（P<0.01），且黏膜下层毛细血管扩张更显著。

功能检测证实SPD保护ET动态平衡
ACNP功能测试显示，SPD^-/-
-OVA组的负压清除率仅为WT-OVA组的43%（P<0.0001）。POP测试中，SPD^-/-
-OVA组的开放压力较对照组升高26%（P=0.0076），而WT-OVA组无显著变化。小动物成像显示SPD^-/-
-OVA组中耳腔和ET管腔存在明显的荧光示踪剂滞留，提示MCC功能严重受损。

黏液分泌紊乱是核心病理特征
免疫组化显示SPD^-/-
-OVA组Muc5ac表达量较WT-OVA组增加3.2倍（P=0.0276），并在ET管腔形成黏液栓；免疫荧光显示Muc5b在腺体和杯状细胞的分泌量增加2.1倍（P=0.0276）。这种Muc5ac/Muc5b比例失衡可能是导致黏液流变学异常的关键因素。

外源性SPD展现治疗潜力
鼻内给予重组小鼠SPD（rmSPD）4天后，SPD^-/-
-OVA组的黏膜厚度减少31%（P<0.01），嗜酸性粒细胞浸润减少65%（P<0.01），Muc5ac/Muc5b表达分别下调42%和38%（P<0.01），ACNP功能恢复至WT-OVA组的89%（P<0.01）。

结论与意义
该研究首次阐明SPD通过调控嗜酸性粒细胞浸润和黏液分泌（特别是抑制Muc5ac过度表达）维持ET免疫稳态。SPD缺失会导致OVA诱导的过敏反应在ET局部放大，表现为"三重打击"：炎症加剧、黏液流变学异常和机械功能受损。值得注意的是，即使在过敏反应发生后，外源性SPD仍能显著改善病理改变，这为临床过敏性ETD的干预提供了全新思路——SPD不仅可作为预后标志物，其重组蛋白更有望成为首个针对ET局部免疫微环境的靶向治疗剂。未来研究需进一步明确SPD调控Muc5ac/Muc5b表达的分子通路，并探索其在慢性过敏模型中的长期疗效。