DCDC2/ENO1-FGL1/LAG-3轴通过激活AKT通路和免疫检查点促进肝内胆管癌进展及免疫逃逸

本研究针对肝内胆管癌（ICC）诊断标志物匮乏和免疫治疗响应率低的临床难题，揭示了DCDC2作为新型肿瘤相关抗原通过稳定ENO1蛋白激活AKT通路促进肿瘤增殖转移，并通过上调FGL1-LAG-3免疫检查点抑制CD8+ T细胞功能的双重机制。该发现为ICC早期诊断提供了血清学标志物（抗DCDC2自身抗体），并为联合靶向AKT和LAG-3的免疫治疗策略提供理论依据。

　　

肝内胆管癌（ICC）作为第二常见的原发性肝癌，具有症状隐匿、手术机会少（60-70%患者无法手术）和化疗耐药的特点，患者一线治疗后中位生存期仅约1年。更严峻的是，近半数ICC患者对免疫检查点抑制剂反应不佳，这促使研究者寻找新的诊断标志物和治疗靶点。

复旦大学附属中山医院的研究团队发现，双皮质素结构域蛋白2（DCDC2）在ICC组织中异常高表达且分布紊乱，其血清自身抗体水平可区分ICC患者与健康人群。通过构建人源化PBMC小鼠模型和同源移植模型，研究人员首次揭示DCDC2通过双重机制促进ICC恶性进展：一方面通过DCX结构域结合ENO1（烯醇化酶1）并抑制FBXW7介导的泛素化降解，从而增强AKT磷酸化驱动肿瘤增殖转移；另一方面通过ENO1结合FGL1（纤维蛋白原样蛋白1）启动子区域，上调FGL1表达进而激活FGL1-LAG-3免疫检查点，显著抑制CD8⁺
T细胞的颗粒酶B和IFN-γ分泌。该研究发表于《Journal of Experimental》，为ICC提供了从诊断到治疗的完整解决方案。

关键技术方法包括：1）HuProt蛋白芯片筛选ICC相关自身抗体；2）188例ICC组织芯片（Fudan-Cohort-IV）的免疫组化分析；3）人源化NOG小鼠模型（5×10⁶
PBMC移植）和同源C57小鼠模型；4）染色质免疫共沉淀（ChIP）验证ENO1对FGL1启动子的结合；5）流式细胞术检测肿瘤浸润淋巴细胞功能。

【DCDC2是ICC相关抗原且预后不良】
通过HuProt芯片筛选和TCGA-CHOL队列验证，发现DCDC2在ICC组织中特异性高表达（较正常胆管高5.8倍），其血清自身抗体水平对ICC诊断AUC达0.89。组织芯片显示DCDC2高表达患者5年生存率降低42%（p<0.001）。

【DCDC2通过AKT通路促进ICC进展】
过表达DCDC2使ICC细胞迁移能力增强2.3倍（p<0.001），AKT磷酸化水平提升4.1倍。AKT抑制剂Perifosine可完全逆转DCDC2促转移效应，证实该通路的关键作用。

【DCDC2-ENO1-FGL1轴介导免疫逃逸】
质谱鉴定发现DCDC2通过第1个DCX结构域（1-115aa）结合ENO1的TIM桶状结构域（140-434aa），使ENO1半衰期延长至12小时（对照组4小时）。ENO1作为转录因子直接激活FGL1启动子（荧光素酶活性提升5.7倍），导致CD8⁺
T细胞功能抑制。

【LAG-3抗体治疗逆转免疫抑制】
人源化模型中，抗LAG-3抗体使DCDC2过表达组的肿瘤体积缩小62%（p<0.001），CD8⁺
T细胞IFN-γ分泌恢复至对照组水平。但该效应在FGL1敲除后消失，证实FGL1-LAG-3轴的核心地位。

该研究首次阐明DCDC2作为"双功能开关"同时调控ICC细胞内在增殖通路和外在免疫微环境。临床转化方面，抗DCDC2自身抗体ELISA试剂盒（检测限1μg/ml）已进入转化阶段，而靶向DCDC2-ENO1相互作用的小分子抑制剂正在开发中。理论层面，发现ENO1从代谢酶到转录调控者的功能转换，为" moonlighting蛋白"研究提供新范式。值得注意的是，DCDC2在胆管发育异常疾病中的作用提示其可能参与ICC癌前病变，这为高危人群筛查提供新思路。