角质细胞中BEST2表达增强缓解银屑病炎症的机制研究及中药单体雷公藤甲素的治疗潜力

本研究针对银屑病炎症调控机制不明的问题，通过M5诱导的HaCaT细胞模型和咪喹莫特(IMQ)小鼠模型，揭示中药单体雷公藤甲素(TP)通过上调BEST2表达抑制JAK2/STAT3通路，从而改善角质细胞异常增殖和炎症反应。该研究为银屑病靶向治疗提供了新策略，并证实TP乳膏局部给药的安全有效性。

　　

银屑病作为一种慢性炎症性皮肤病，全球患病率约2%-3%，其特征性病变包括角质形成细胞异常增殖和免疫细胞浸润。尽管现有生物制剂如IL-17/23抑制剂已取得显著疗效，但治疗成本高且存在复发风险。传统中药雷公藤及其活性成分雷公藤甲素(Triptolide, TP)在临床实践中展现抗银屑病潜力，但其分子机制尚未阐明。值得注意的是，钙激活氯通道(Calcium-activated chloride channels, CaCCs)家族成员在皮肤炎症中的作用日益受到关注，而Bestrophin-2(BEST2)作为该家族成员，其与银屑病的关联仍是未解之谜。

济宁市第一人民医院的研究团队通过整合计算生物学预测和实验验证，首次揭示BEST2在TP抗银屑病效应中的核心地位。研究采用M5细胞因子混合物(含IL-17A、IL-22等)刺激人永生化角质形成细胞(HaCaT)构建体外模型，结合IMQ诱导的小鼠银屑病样皮炎模型，系统评估TP的疗效机制。关键技术包括：转录组测序筛选靶点、CCK-8检测细胞活力、流式细胞术分析细胞周期/凋亡、Western blot检测信号通路蛋白、免疫组化分析组织表达，以及ELISA定量血清细胞因子水平。

研究结果部分：

1. TP显著促进BEST2表达
   转录组分析显示0.125μM TP处理24小时使BEST2 mRNA表达量显著提升(log₂
   FC=0.9917)，KEGG富集分析提示TP调控基因与JAK-STAT等银屑病相关通路密切关联。

2. TP抑制角质细胞异常增殖
   CCK-8实验证实TP以剂量依赖性方式抑制M5诱导的HaCaT增殖(IC₅₀
   =1.85μM)，流式细胞术显示TP通过下调CyclinD1/CDK4使细胞阻滞于G₀
   /G₁
   期，同时上调促凋亡蛋白Bax和cleaved Caspase-3/9。

3. BEST2调控JAK2/STAT3通路
   Western blot揭示TP处理组p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3比值显著降低，而JAK2抑制剂JAK2-IN-6不影响BEST2表达，证实BEST2位于该通路上游。过表达BEST2的HaCaT细胞同样表现出JAK2/STAT3磷酸化抑制。

4. TP乳膏的体内疗效
   0.002%TP乳膏局部应用使IMQ小鼠PASI评分降低67%，表皮厚度减少5倍，且未引起肝肾功能损伤。免疫组化显示治疗组皮肤BEST2表达增强，同时p-JAK2/p-STAT3信号减弱。

讨论与结论：
该研究首次建立BEST2-JAK2/STAT3轴在银屑病发病中的调控机制，阐明TP通过"上调BEST2→抑制JAK2/STAT3→阻断角质细胞增殖/炎症"的作用链条。特别值得注意的是，0.002%TP乳膏的局部给药方案在保证疗效的同时规避了传统口服给药的肝肾毒性，为中药现代化研究提供范例。论文发表于《International Immunopharmacology》，为开发新型银屑病靶向药物奠定理论基础，同时拓展了离子通道在皮肤疾病中的研究视野。未来研究可进一步探索BEST2与角质细胞代谢重编程的关联，以及TP与其他抗银屑病药物的协同效应。