TLR3/IL-36信号轴调控中性粒细胞胞外诱捕网形成与巨噬细胞活化在急性肝衰竭中的作用及治疗潜力

急性肝衰竭（ALF）的炎症驱动机制尚不明确，吉林大学研究团队聚焦TLR3介导的IL-36信号通路，发现其通过促进中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）形成和巨噬细胞活化加剧ALF进程。研究证实阻断IL-36R可显著减轻肝损伤，为ALF治疗提供了新靶点。

　　

急性肝衰竭（ALF）是一种以突发性肝细胞坏死为特征的致命性疾病，死亡率高达50%-80%。尽管已知免疫细胞过度激活是ALF的核心病理机制，但其中性粒细胞与巨噬细胞协同作用的分子通路仍存在重大知识空白。尤其令人困惑的是，TLR3（Toll样受体3）和IL-36（白细胞介素36）这两个看似独立的免疫调节系统，如何在ALF中形成交叉对话并驱动疾病进展。

吉林大学研究团队在《International Immunopharmacology》发表的研究，首次系统揭示了TLR3通过激活IL-36信号通路，双重调控中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）形成和巨噬细胞活化的分子机制。研究人员采用Poly(I:C)/D-GalN诱导的ALF小鼠模型，结合Il1rl2（编码IL-36R）基因敲除鼠，通过免疫印迹、免疫荧光染色等技术，发现TLR3激动剂可显著提升IL-36γ水平并促进NETs释放。

关键实验技术

1. TLR3特异性配体Poly(I:C)刺激小鼠腹腔巨噬细胞（MPMs）和骨髓源性巨噬细胞（BMDMs）
2. 建立Poly(I:C)/D-GalN和急性乙醇灌胃诱导的ALF模型
3. 慢病毒介导的shRNA基因沉默技术构建Il1rl2缺陷小鼠
4. 免疫印迹和免疫荧光检测NETs标志物（如瓜氨酸化组蛋白H3）

ATP增强巨噬细胞IL-1β分泌的TLR3/IL-36机制
研究发现TLR3配体Poly(I:C)联合ATP可显著激活IL-36信号通路，促进IL-1β释放。当使用IL-36受体拮抗剂（IL-36Ra）或敲除Il36g基因时，促炎因子IL-1β和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的分泌明显受抑，证实IL-36是TLR3下游的关键炎症放大器。

IL-36R缺失减轻ALF病理损伤
在ALF模型中，IL-36R敲除小鼠表现出：肝损伤标志物降低50%、NETs形成减少70%、脂质沉积显著改善。通过RNA测序发现，IL-36R缺陷可下调CCL3、CXCL1等趋化因子表达，阻断中性粒细胞向肝脏的募集。

TLR3-IL-36-NETs轴的治疗潜力
研究首次证明：1）TLR3激活通过TRIF（TIR结构域衔接蛋白）依赖途径上调IL-36γ表达；2）IL-36γ通过自分泌循环持续激活巨噬细胞；3）NETs释放的DNA片段通过TLR9进一步放大炎症信号，形成恶性循环。

该研究不仅阐明了ALF中TLR3/IL-36/NETs轴的级联放大机制，更发现临床常用药物双嘧达莫（Dipyridamole）可通过抑制P2X7R（嘌呤能受体）阻断该通路。这为开发靶向IL-36R的生物制剂或小分子抑制剂提供了理论依据，对脓毒症相关肝损伤等其他炎症性疾病也有重要借鉴意义。