基于多组分五环三萜纳米平台协同递送CDK4/6抑制剂增强三阴性乳腺癌化学免疫治疗的创新研究

本研究针对三阴性乳腺癌（TNBC）免疫治疗响应率低（<20%）的难题，开发了一种由天然三萜（PT）与CDK4/6抑制剂Palbociclib（Pal）共组装的纳米平台。通过系统筛选四种PT分子，构建了具有高载药效率（>57%）的二元纳米体系，证实其通过π-π堆积、氢键及疏水作用驱动自组装。该平台不仅增强Pal诱导的G1/S期阻滞，还协同诱导免疫原性细胞死亡（ICD），显著激活抗PD-L1免疫应答并重塑肿瘤免疫微环境（TIME），为TNBC精准治疗提供新策略。

　　

三阴性乳腺癌（TNBC）因缺乏雌激素受体、孕激素受体和HER2表达，治疗选择极为有限。尽管免疫检查点抑制剂（如抗PD-L1抗体）展现出潜力，但“冷肿瘤”特性导致的低免疫浸润和免疫抑制微环境（TIME）使其临床响应率不足20%。传统化疗联合免疫治疗虽有一定效果，但存在毒性大、靶向性差等问题。更棘手的是，明星药物CDK4/6抑制剂Palbociclib（Pal）虽能调控细胞周期并具免疫调节作用，却面临单药疗效有限、与常规化疗药拮抗等挑战。如何整合化学治疗、免疫激活与细胞周期调控，成为突破TNBC治疗瓶颈的关键。

中国的研究团队在《Journal of Colloid and Interface Science》发表研究，提出了一种革命性的解决方案：利用天然五环三萜（PT）的多组分自组装特性，构建协同递送Pal的纳米平台。通过筛选齐墩果酸（OA）、山楂酸（MA）等四种PT分子，团队发现二元PT系统可显著提升Pal载药效率（>15%）并优化纳米形态。代表性纳米颗粒nano-OMPal（OA+MA+Pal）通过π-π堆积、氢键和疏水作用稳定组装，其直径约120 nm且电位-25 mV，透射电镜显示为均一球形结构。

关键实验技术
研究采用MTT法评估细胞毒性，流式细胞术分析细胞周期与凋亡，免疫荧光检测钙网蛋白（CRT）暴露以验证ICD效应，ELISA定量ATP/HMGB1释放。通过转录组测序解析细胞周期调控通路，并建立4T1小鼠TNBC模型评估体内抗肿瘤及免疫调节效果。

筛选PT介导的多组分递送平台
团队发现所有二元PT系统（如OA+MA、CA+BC）均能与Pal形成稳定纳米球，载药效率提升至18.7%（单组分仅12.3%）。分子动力学模拟揭示OA与MA的羧基与Pal吡啶环形成氢键，而疏水核心促进自发性组装。

协同抗肿瘤机制
nano-OMPal使4T1细胞G1期比例增至68.2%（Pal单药为52.1%），Western blot显示其显著抑制CDK4/6-Rb-E2F通路关键蛋白。共培养实验证实该平台使CD8⁺
T细胞浸润提升3倍，并降低Treg比例，协同抗PD-L1使小鼠肿瘤完全消退率达40%。

结论与意义
该研究首创了天然产物多组分纳米协同平台，实现三大突破：① 通过PT分子动态调控解决Pal载药效率低的问题；② 整合化疗（ICD诱导）、细胞周期干预与免疫调节多机制协同；③ 为克服CDK4/6抑制剂耐药提供新思路。其临床转化潜力在于组分均为已获批药用辅料，且制备工艺简单。未来可拓展至其他难治性癌症，推动精准免疫治疗发展。