XCL1修饰的树突状细胞外泌体联合顺铂诱导免疫原性细胞死亡治疗去势抵抗性前列腺癌的协同机制研究

（编辑推荐）本研究创新性地通过基因工程改造树突状细胞（DC）使其外泌体（DEXXCL1 ）高表达趋化因子XCL1，联合顺铂诱导的免疫原性细胞死亡（ICD），显著增强cDC1细胞趋化与抗原呈递能力，促进CD8+ T细胞增殖与杀伤活性，重塑前列腺癌"冷肿瘤"免疫微环境，为去势抵抗性前列腺癌（CRPC）免疫治疗提供新策略。

　　

【背景】
前列腺癌作为男性高发恶性肿瘤，去势抵抗性前列腺癌（CRPC）阶段缺乏有效治疗手段。研究聚焦"冷肿瘤"特征——肿瘤微环境中淋巴细胞浸润不足、XCL1趋化因子低表达等关键问题。树突状细胞（DC）来源的外泌体（DEX）因其天然抗原呈递能力和低免疫原性，成为理想的纳米疫苗载体。

【材料与方法】
采用基因工程技术将XCL1编码序列插入PDGFR跨膜结构域上游，转染DC2.4细胞系获得XCL1过表达DC（DC_xcl1
）。通过Poly I:C和CD40L诱导成熟后，超速离心法分离外泌体（DEX_XCL1
）。通过透射电镜（TEM）、纳米颗粒追踪分析（NTA）和Western blot验证其形态、粒径（116nm）及XCL1表达。建立RM-1前列腺癌皮下移植瘤模型和OVA抗原模型，联合顺铂（30mg/kg）治疗，采用流式细胞术分析免疫细胞亚群、ELISA检测细胞因子。

【结果】

1. 外泌体特性：DEX_XCL1
   表面富集CCR7（267.80±6.92 vs 对照88.25±6.44）和MHC I（1873.00±79.98 vs 721.70±29.87），促进DC摄取效率提升至84.26±1.70%。
2. 免疫激活：DEX_XCL1
   处理组CD8⁺
   CD69⁺
   T细胞比例达61.27±2.07%，IFN-γ分泌量（180.60±21.93 pg/ml）显著高于对照组。
3. 协同效应：联合治疗组肿瘤重量（0.25±0.06g）较单药组降低74%，生存率提升至62%；肿瘤内XCR1⁺
   SIRPα^-
   cDC1细胞浸润增加3.8倍，OVA抗原呈递效率（1979.00±74.68 MFI）提升5.5倍。

【讨论】
该策略通过双重机制突破免疫抑制：

1. 顺铂诱导ICD释放STEAP1抗原（72h达峰56.37±6.42 pg/ml），提供抗原来源；
2. DEX_XCL1
   募集cDC1并提升其CD83表达（186.00±7.43 vs 67.75±5.27），形成免疫正向循环。值得注意的是，治疗显著降低Treg比例（11.03±0.53% vs 30.25±1.39%）和TGF-β水平（0.97±0.10 vs 4.25±0.47 pg/ml）。

【展望】
尽管未实现完全缓解，该平台技术可通过整合免疫检查点抑制剂或CAR-T细胞进一步优化。未来需解决人源DEX规模化生产、靶向肽筛选等转化医学问题，其普适性设计对高异质性肿瘤治疗具有重要参考价值。