壳聚糖纳米载体递送银合欢亚油酸靶向抑制FOXL2突变治疗卵巢颗粒细胞瘤的研究

本研究针对卵巢颗粒细胞瘤(GCT)中FOXL2基因突变导致的治疗难题，创新性地采用壳聚糖纳米颗粒(LACS2)封装银合欢(Leucaena leucocephala)提取的亚油酸(LA)，通过体外和体内实验证实其可逆转TGC→TGG突变，恢复野生型FOXL2功能。研究通过FTIR、NMR等技术表征纳米颗粒特性，发现LACS2具有120nm粒径、88%包封率和98.88%药物释放率，显著降低肿瘤体积(24.01mL)并提升生存期(28.14天)。该研究为基因靶向纳米疗法提供了新策略，论文发表于《Next Nanotechnology》。

　　

卵巢颗粒细胞瘤(GCT)是一种罕见的激素分泌性肿瘤，约占卵巢癌的2-5%，其中95%的成年患者存在FOXL2基因特征性C134W突变。这种突变导致转录因子功能异常，引发细胞增殖失控。目前临床治疗面临两大困境：传统化疗药物全身毒性大，且缺乏针对FOXL2突变的靶向疗法。与此同时，植物活性成分如亚油酸(LA)虽具抗癌潜力，但存在生物利用度低、靶向性差等问题。

为解决这些问题，迈杜古里大学药学院的研究团队创新性地将银合欢根提取的LA封装于壳聚糖纳米颗粒(LACS2)中，系统评估了其对甲基亚硝基脲(MNU)诱导的Wistar大鼠卵巢GCT的治疗效果。研究发现LACS2/FOXL2复合物能有效逆转突变，恢复野生型基因功能，使肿瘤体积缩小67%，显著延长生存期。这项突破性成果发表于《Next Nanotechnology》，为基因靶向纳米疗法提供了新范式。

研究采用四大关键技术：1)通过柱色谱法从银合欢根 ethyl acetate 组分分离LA，经FTIR、GC-MS和NMR鉴定结构；2)采用纳米喷雾干燥法制备不同交联度的LA-壳聚糖纳米粒(LACS1-4)；3)使用动态光散射(DLS)和Zeta电位分析纳米粒理化性质；4)建立MNU诱导的Wistar大鼠GCT模型，通过RT-PCR、MTT法和 caspase-3活性检测评估基因治疗效应。

【3.1 植物化学成分】
银合欢根甲醇提取物含丰富生物活性物质，包括总酚类(1260.14 mg GAE/g)和总黄酮(408.24 mg QE/g)，为后续LA分离奠定基础。

【3.2 LA分离鉴定】
通过光谱分析确认LA结构特征：FTIR显示羧酸O-H键(3500cm^-1
)和烯烃C=C键(1680cm^-1
)；¹
H NMR检测到特征质子信号(δ5.3-5.4ppm)；GC-MS显示分子离子峰m/z 280。

【3.3 LACS2特性】
优化后的LACS2展现理想药物递送性能：粒径120±2.11nm，PDI 0.50，zeta电位+25.22mV，8小时累积释放率达98.88%。电镜显示其呈规则球形，与FOXL2基因复合效率达86.22%。

【3.4 抗肿瘤效果】
LACS2/FOXL2治疗组肿瘤体积(24.01mL)仅为模型组的31%，非活细胞数提升至15.57×10⁴
/mL。血液指标显著改善：血红蛋白(Hb)升至38.02g/dL，白细胞(WBC)恢复至36.56×10⁹
/L。

【3.5 分子机制】
RT-PCR显示LACS2/FOXL2使突变型TGG恢复为野生型TGC。流式细胞术证实其通过激活caspase-3诱导凋亡，MTT实验显示IC₅₀
为12.01μg/mL。

该研究创新性地将植物活性成分与基因治疗相结合，证实壳聚糖纳米载体可显著提升LA的靶向性和疗效。其核心价值在于：1)首次实现FOXL2突变原位修复；2)建立可量化的纳米药物表征体系；3)为罕见肿瘤提供具转化潜力的治疗方案。值得注意的是，LACS2使大鼠生存期延长至28.14天，IL-6等肿瘤标志物显著降低，这种"植物成分-纳米载体-基因调控"的三联疗法模式，为攻克基因突变相关肿瘤提供了新思路。未来研究可进一步优化给药方案，探索与其他靶向药物的协同效应。