慢性应激通过下丘脑-垂体-睾丸轴紊乱及氧化应激损害雄性大鼠生殖功能的研究

本研究针对慢性应激导致男性不育的机制难题，通过冷浸水应激（CWI）模型揭示：应激通过抑制下丘脑Kisspeptin（Kiss1）和促性腺激素释放激素（GnRH），降低血清LH和睾酮（T），同时升高皮质酮，诱发附睾氧化应激（ROS↑、SOD/CAT/GPx4↓），最终导致精子质量下降、体外受精（IVF）成功率降低及胚胎发育异常，为临床男性不育干预提供新靶点。

　　

在现代社会，慢性应激已成为威胁男性生殖健康的隐形杀手。据统计，全球约15%的夫妇面临不孕问题，其中男性因素占比高达50%。临床观察发现，长期处于压力状态的男性常伴随精子浓度降低、活力下降及畸形率升高等问题，但其深层机制尚未完全阐明。尤其令人困惑的是，应激如何通过神经内分泌系统与氧化应激的交互作用，最终损害精子功能？这一科学问题的解答，对开发针对性干预策略至关重要。

针对这一空白，墨西哥大都会自治大学健康与生物科学部的研究团队在《Reproductive Biology》发表了一项开创性研究。该团队通过建立雄性大鼠冷浸水应激（CWI）模型，系统揭示了慢性应激通过扰乱下丘脑-垂体-睾丸轴（HPT轴）神经内分泌调控，诱发附睾氧化损伤，进而损害精子受精能力的级联机制。

关键技术方法
研究选用3月龄雄性Wistar大鼠，分为对照组和CWI应激组（每日冷水浸泡连续50天）。实验采用ELISA检测血清黄体生成素（LH）、睾酮（T）和皮质酮水平；Western Blot分析下丘脑Kiss1和GnRH表达；通过检测附睾活性氧（ROS）、脂质过氧化物及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx4）评估氧化应激状态；计算机辅助精液分析（CASA）评估精子参数；体外受精（IVF）实验验证精子功能。

研究结果

1. 体重增长与器官重量
CWI应激组大鼠从第10天起体重增长显著减缓，睾丸及附属腺体重量较对照组降低，提示慢性应激导致全身代谢抑制及生殖器官发育受损。

2. 神经内分泌轴紊乱
应激组下丘脑Kiss1和GnRH蛋白含量分别降低42%和35%，血清LH和T浓度下降48%和52%，而皮质酮水平升高2.3倍。这表明应激通过抑制KNDy神经元（注：分泌Kiss1的神经元群）活性，阻断HPT轴正向调控。

3. 附睾氧化应激爆发
附睾头、体、尾部的ROS和脂质过氧化物水平均显著增加，SOD、CAT、GPx4活性下降30%-45%，证实应激诱发抗氧化防御系统崩溃。

4. 精子质量全面下降
应激组精子活力（从75%降至43%）、存活率、正常形态率均显著降低，顶体反应异常率增加2.1倍，直接导致受精能力缺陷。

5. 胚胎发育障碍
IVF实验显示，应激组受精卵形成率仅为对照组的61%，胚胎囊胚形成率降低54%，且胚胎碎片化程度显著增加。

结论与意义
该研究首次阐明慢性应激通过“下丘脑Kiss1/GnRH抑制→LH/T下降→附睾氧化应激→精子功能损伤”的级联通路导致雄性不育。特别值得注意的是，附睾作为精子成熟的关键场所，其氧化损伤直接决定精子受精能力，这为开发靶向抗氧化治疗（如GPx4激活剂）提供了理论依据。此外，研究证实应激诱导的高皮质酮水平是触发氧化应激的关键因素，提示临床可通过监测皮质酮水平预警男性生育力风险。

这项研究不仅深化了对应激性不育机制的认识，更提出了从神经内分泌-氧化应激双维度干预的新策略，为男性生殖健康保护提供了重要科学依据。未来研究可进一步探索Kiss1神经元特异性保护或附睾靶向抗氧化治疗的可行性。