染料中间体N-苯基-2-萘胺与邻联甲苯胺：新型环境雄激素对大鼠生殖功能的毒性机制研究

【编辑推荐】本研究针对环境内分泌干扰物（EDCs）中雄激素受体（AR）激动剂研究不足的现状，通过分子对接筛选和表面等离子共振（SPR）技术，首次发现工业染料中间体PNA和o-tolidine能直接结合AR-LBD（配体结合域）并激活转录活性。动物实验证实这两种化合物在未成年大鼠中诱导精囊增生，在成年大鼠中导致睾丸萎缩、睾酮水平下降及精子质量恶化，为环境污染物致男性生殖功能障碍提供了新证据。

　　

在工业化进程加速的今天，环境内分泌干扰物（Endocrine Disrupting Chemicals, EDCs）对生殖健康的威胁日益凸显。尽管环境雌激素的研究已较为深入，但环境雄激素——那些能模拟或干扰天然雄激素作用的化学物质——仍像隐藏在迷雾中的刺客，其作用机制和危害程度尚未被充分认知。更令人担忧的是，许多工业化合物可能通过干扰雄激素受体（Androgen Receptor, AR）信号通路，悄无声息地破坏男性生殖系统，而科学界对此类物质的筛查和鉴定仍存在巨大空白。

香港中文大学（深圳）的研究团队将目光投向了染料工业中广泛使用的两种中间体：N-苯基-2-萘胺（PNA）和邻联甲苯胺（o-tolidine）。这两种化合物在环境中难以降解，且已在河流沉积物中被检出，但它们的内分泌干扰活性一直未被揭示。发表在《Reproductive Toxicology》上的这项研究，首次证实这两种工业化学品是新型环境雄激素，能够直接激活AR并导致雄性大鼠生殖系统多维度损伤。

研究人员采用分子对接技术筛选AR配体结合域（Ligand Binding Domain, LBD）的潜在结合分子，通过表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance, SPR）验证结合活性，并利用双荧光素酶报告基因检测转录激活能力。体内实验采用未成年和成熟SD大鼠模型，通过组织病理学分析和激素检测评估生殖毒性。

PNA和o-tolidine具有体外雄激素活性
分子对接显示PNA和o-tolidine与AR-LBD的结合能（ΔE_binding
）分别为-24.8和-20.6 kcal/mol，高于内源性配体睾酮。SPR分析证实两者直接结合AR-LBD，解离常数（K_D
）达微摩尔级别。在AR报告基因实验中，10 μM PNA使荧光素酶活性提升3.2倍，o-tolidine提升2.8倍，且呈剂量依赖性。

体内雄激素效应与生殖毒性
未成年大鼠实验中，两种化合物（50 mg/kg/天，连续7天）使精囊重量增加40-60%，组织学显示腺泡上皮显著增生。而在成熟大鼠中，相同剂量暴露28天后，睾丸呈现生精小管萎缩，间质细胞减少；血清睾酮水平下降50%以上，精子浓度降低35-45%，畸形率增加2-3倍，运动力显著受损。

这项研究不仅首次鉴定了PNA和o-tolidine的环境雄激素属性，更揭示了工业污染物通过干扰AR信号通路导致男性生殖功能障碍的完整证据链。其重要意义在于：

1. 为环境雄激素的筛查提供了新的分子靶点和检测范式；
2. 解释了某些工业污染区域男性生殖异常发病率升高的潜在机制；
3. 警示需重新评估染料中间体的生产使用规范。

正如通讯作者Pan Wang强调的，这两种"隐形"雄激素的发现，只是环境内分泌干扰物冰山一角。该研究为制定更精准的环境污染物监管政策提供了科学依据，也为男性不育等生殖疾病的病因学研究开辟了新视角。未来需要进一步探索这些化合物在人体中的累积效应及跨代影响，以全面评估其公共卫生风险。