三丁基锡通过PI3K/AKT通路调控YY1介导的CDKN1C表达影响多囊卵巢综合征颗粒细胞生长的机制研究

为探究环境污染物三丁基锡（TBT）如何损害多囊卵巢综合征（PCOS）患者卵巢颗粒细胞功能，研究人员通过MTT、EdU、流式细胞术等技术，发现TBT通过抑制PI3K/AKT通路激活转录因子YY1，上调CDKN1C表达，从而抑制细胞增殖并促进凋亡。该研究为PCOS的病理机制和靶向治疗提供了新思路。

　　

多囊卵巢综合征（PCOS）是育龄女性最常见的内分泌紊乱疾病之一，全球发病率高达6-10%，不仅导致不孕、月经失调，还常伴随胰岛素抵抗和代谢异常。尽管遗传和环境因素共同驱动PCOS发生，但具体机制尚未阐明。近年来，环境内分泌干扰物（EDCs）如三丁基锡（TBT）因其生殖毒性备受关注——它能通过食物链进入人体，干扰激素信号，诱发卵巢萎缩和卵泡发育异常。然而，TBT如何影响PCOS患者卵巢颗粒细胞的功能，仍是未解之谜。

为回答这一问题，中国科学院细胞库的研究团队以人卵巢颗粒样肿瘤细胞系KGN为模型，通过浓度梯度实验筛选出50 nM TBT（使细胞活力降至50%的临界浓度）进行干预。研究采用CCK-8检测细胞活力、EdU标记增殖细胞、流式细胞术分析周期和凋亡，同时结合Western blot检测关键蛋白表达。结果发现，TBT显著抑制颗粒细胞活力，阻滞细胞周期于G₁
期，并激活凋亡标志物Caspase-3。机制上，TBT通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路，上调转录因子阴阳1（YY1）的表达，进而促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1C（CDKN1C）的转录。当研究者通过基因沉默技术敲低YY1或CDKN1C时，TBT的细胞毒性明显减轻；反之，过表达CDKN1C会逆转这种保护效应。

细胞培养与转染
KGN细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养，通过siRNA转染实现基因沉默，利用脂质体法进行质粒转染以过表达目标基因。

TBT对卵巢颗粒细胞的损伤
50 nM TBT处理使细胞活力下降50%，乳酸脱氢酶（LDH）泄漏增加，证实其细胞膜损伤作用。流式结果显示G₁
期细胞比例升高，EdU阳性率降低，提示增殖受抑。

讨论与结论
该研究首次揭示TBT通过PI3K/AKT-YY1-CDKN1C轴破坏颗粒细胞稳态的分子机制：CDKN1C作为CDK抑制剂，通过与cyclin-CDK复合物结合阻断细胞周期进程；而YY1作为转录因子直接调控CDKN1C表达。这一发现不仅解释了环境污染物加剧PCOS的潜在途径，还为开发靶向YY1或CDKN1C的干预策略提供了理论依据。论文发表于《Reproductive Biology》，其创新性在于将环境毒理学与生殖内分泌学交叉融合，为PCOS的病因学补充了环境暴露维度。未来研究可进一步探索临床样本中YY1-CDKN1C通路的异常激活是否与TBT暴露水平相关，以及靶向该通路能否改善PCOS患者的卵巢功能。