靶向猪Y染色体精子质膜的单克隆抗体制备及其在性别控制中的应用

本研究针对养猪业对雌性仔猪的迫切需求，开发了靶向猪Y染色体精子(Y-sperm)质膜的单克隆抗体(C2B2-MAbs)。通过流式细胞分选获得高纯度(92.08%)Y-sperm免疫小鼠，构建杂交瘤细胞系，最终获得特异性结合率达100%且与X-sperm交叉反应仅3.25%的抗体，为低成本、高效率的猪精液性别分选提供了新方案。

　　

在养猪业中，雌性仔猪作为后备母猪具有重要经济价值，但传统流式细胞分选(FACS)技术存在设备昂贵、精子损伤严重等问题。为解决这一瓶颈，泰国清迈大学的研究团队创新性地采用免疫学方法，成功制备出靶向猪Y-sperm质膜的单克隆抗体C2B2-MAbs，相关成果发表于《Reproductive Biology》。

研究采用流式细胞分选获得高纯度Y-sperm抗原，通过杂交瘤技术构建抗体文库，经间接ELISA筛选获得特异性克隆C2B2。实验涉及免疫荧光染色、交叉反应测试等技术，样本包括猪、安格斯牛、荷斯坦牛等多畜种精子。

【Quality of Y-sperm antigen】
流式分选证实Y-sperm纯度达92.08%，X-sperm纯度91.76%，为后续实验提供可靠抗原。

【Discussion】
C2B2-MAbs与Y-sperm结合率高达100%，显著低于X-sperm(3.25%)，且对牛(安格斯0.34%、荷斯坦0.38%)、水牛(0.25%)等畜种交叉反应极低。免疫荧光显示抗体特异性结合Y-sperm质膜，形成明显FITC荧光信号。

【Conclusion】
该研究首次成功制备猪特异性Y-sperm单克隆抗体，突破传统FACS技术局限。抗体在保留精子活力前提下实现高效分选，为养猪业性别控制提供新工具。研究得到泰国高等教育科研创新部农业生物技术卓越中心资助，O.C.等作者声明使用ChatGPT 3.5进行语言润色但内容责任自负。

重要意义在于：①相较FACS技术每小时仅能处理20×10⁶
精子的低效，免疫法可规模化生产；②避免Hoechst 33342染料对精子的DNA损伤；③为开发类似牛业WM抗体的商业应用奠定基础，有望提升母猪繁殖效率并减少阉割需求。