澳大利亚本土野生动物中伯氏柯克斯体(Coxiella burnetii)的分子检测与特征分析：揭示Q热潜在野生动物宿主的新证据

本研究针对澳大利亚本土野生动物(ANW)作为Q热病原体伯氏柯克斯体(C. burnetii)潜在储存宿主的关键科学问题，通过优化多重qPCR(CoxMP)检测体系，系统调查了新南威尔士州等地区141只动物组织样本中C. burnetii DNA流行率。研究发现仅0.7%样本呈阳性，基因分型显示阳性株与人类临床株CbAU02相同，为野生动物-人畜共患病传播风险提供了重要分子证据，强调Q热疫苗接种对野生动物接触者的必要性。

　　

Q热(Q fever)这种由伯氏柯克斯体(Coxiella burnetii)引起的人畜共患病，自1935年在澳大利亚昆士兰屠宰场工人中首次被发现以来，一直是全球公共卫生的重要威胁。这种高度传染性的病原体不仅能通过气溶胶传播，其孢子样结构更可在环境中存活长达150天。虽然家养反刍动物被认为是主要传染源，但越来越多的证据表明澳大利亚本土野生动物(ANW)可能扮演着神秘"配角"的角色——既往研究显示某些袋鼠种群血清阳性率高达94%，分子检测阳性率可达25%。这种矛盾现象引发关键科学问题：野生动物究竟是真正的生态储存宿主，还是检测方法特异性不足导致的"假阳性"假象？

悉尼大学兽医科学学院的研究团队在《FEMS Microbiology Letters》发表的研究给出了重要答案。研究人员创新性地采用靶向IS1111、com1和htpAB三个基因的多重qPCR(CoxMP)体系，配合严格的阳性判定标准，对新南威尔士州等地区141只野生动物(主要是袋鼠和袋熊)的组织样本进行系统检测。技术方法上，研究采用高通量DNA提取结合优化后的CoxMP检测体系(LOD为11个基因组当量/反应)，建立三级分类系统(阳性/可疑/阴性)，并通过MLVA分型对阳性样本进行基因特征分析。

研究结果部分呈现了丰富发现：

"Molecular detection and characterisation"部分显示，在Valla地区的东部灰袋鼠(EGK)泄殖腔拭子中检出唯一阳性样本(Cq值30.4-36)，估算约含11个基因组当量。MLVA分型鉴定为CbAU02基因型——该型别曾从澳大利亚Q热患者中分离获得，建立了野生动物株与临床株的直接分子关联。

"Geographical location of native animals"部分揭示采样地理分布特征，样本主要来自Q热中低发病率地区(新南威尔士州年发病率3.07/10万)，这可能是检出率(0.7%)显著低于昆士兰州(发病率6.26/10万)研究的原因之一。

"Sample classification criteria"详细阐述了严格的判定标准：要求三个靶基因在三次重复中均能稳定扩增且Cq值低于预设阈值(LOD对应Cq：IS1111≤34，com1≤36，htpAB≤35)。这种策略有效规避了既往仅依赖IS1111单基因检测可能导致的假阳性问题——该基因在蜱类共生体(CLE)中也存在同源序列。

"Multi-locus variable number of tandem repeat genotype analysis"部分通过MLVA技术确认阳性样本的流行病学意义。CbAU02型别与人类临床株的基因关联性，为理解野生动物在Q热传播链中的作用提供了关键分子证据。

讨论部分深刻指出，本研究采用的"三重验证"策略(多基因靶标+重复检测+MLVA分型)建立了野生动物C. burnetii检测的新标准。虽然检出率低，但泄殖腔拭子阳性样本提示粪便/尿液可能是野生动物排菌途径，这与反刍动物的已知传播模式形成有趣对比。特别值得注意的是，研究强调当前澳大利亚野生动物工作者Q热风险可能仍主要来自传统传染源(家畜)，这一发现为精准防控策略提供了重要依据。作为全球唯一拥有Q热人用疫苗(Q-Vax?)的国家，该研究进一步强化了澳大利亚高风险职业人群接种疫苗的公共卫生建议。