基于APTT建立未分级肝素治疗范围(HTR)方法的比较研究与影响因素分析

本研究针对未分级肝素(UFH)治疗范围(HTR)建立方法的差异性问题，通过对比体外(in vitro)与体内(ex vivo)两种方法，结合41例患者样本和38例健康人血浆，系统分析了APTT与抗Xa活性的相关性。研究发现凝血因子VIII和XII水平是导致方法差异的关键因素，并为不同检测系统(如Stago试剂)的HTR校准提供临床指导。

　　

肝素作为临床应用最广泛的抗凝药物之一，其治疗窗口狭窄且个体差异显著，如何精准监测成为临床难题。目前主要依赖活化部分凝血活酶时间(APTT)和抗因子Xa活性(anti-Xa)两种方法，但APTT易受试剂、仪器及患者凝血因子水平等多因素干扰，导致不同实验室建立的肝素治疗范围(HTR)存在显著差异。更棘手的是，指南推荐的体内(ex vivo)方法与实际常用的体外(in vitro)方法结果不一致，但成因尚未阐明。

中国医学科学院的研究团队在《Clinica Chimica Acta》发表的研究，首次系统比较了两种HTR建立方法的差异机制。研究人员收集41例UFH治疗患者的外周血样本(ex vivo)和38例健康人混合血浆(NPP)制备的加标样本(in vitro)，通过指数模型拟合APTT-anti-Xa曲线。同时采用Succeeder、HemosIL和Stago三家厂商的APTT检测系统，分析凝血因子、纤维蛋白原(FIB)、抗凝血酶(AT)等对HTR的影响。

关键技术包括：1) 采用指数模型拟合APTT与anti-Xa活性的剂量效应曲线；2) 对比分析41例患者ex vivo样本与38例健康人NPP的in vitro样本；3) 评估三种商业APTT检测系统(Succeeder/HemosIL/Stago)的HTR差异；4) 检测凝血因子VIII/XII等对HTR的调控作用。

【结果】

1. 方法学比较：ex vivo法建立的HTR普遍低于in vitro法，且随UFH浓度升高差异加剧。患者样本中凝血因子VIII和XII水平与HTR呈负相关，高水平因子导致HTR降低。

2. 影响因素：ex vivo法的个体差异与特定凝血因子相关，而in vitro法因使用标准化血浆，避免了此类变异。凝血因子水平的样本间差异是两种方法分歧的重要原因。

3. 检测系统比较：三种APTT系统建立的HTR无显著差异，但Stago系统上限值较低、范围更窄，提示试剂成分可能影响结果。

【结论与意义】
该研究首次揭示凝血因子VIII/XII是导致ex vivo与in vitro法HTR差异的核心因素，为临床实验室方法选择提供了循证依据。当使用ex vivo法时，需考虑患者凝血因子异常对结果的干扰；而更换检测试剂时，应重新建立匹配的HTR。这些发现解决了UFH监测中长期存在的标准化难题，对减少血栓/出血风险具有重要临床价值。研究还证实，结合APTT与anti-Xa活性的HTR策略，比单一检测更能准确反映UFH疗效，为个体化抗凝治疗提供了新思路。作者Zixin Chen等强调，未来需开展多中心研究进一步验证不同人群的HTR差异机制。