pH敏感型纳米颗粒负载白藜芦醇诱导结肠癌细胞免疫原性死亡的构建与评价

针对结肠癌(CC)免疫治疗中免疫激活不足的难题，研究人员开发了pH敏感型纳米颗粒(RPP NPs)，通过负载白藜芦醇(RES)靶向递送并诱导免疫原性细胞死亡(ICD)。该载体利用PBAE-PEI(PP)的pH响应特性实现溶酶体逃逸和RES可控释放，显著增强CT26细胞中损伤相关分子模式(DAMPs)的释放，促进树突状细胞(DCs)成熟，为CC免疫治疗提供了新策略。

　　

结肠癌是全球死亡率排名第二的恶性肿瘤，传统疗法存在靶向性差、毒性大等局限。尽管免疫治疗能利用机体免疫系统对抗肿瘤，但肿瘤免疫原性不足仍是关键瓶颈。免疫原性细胞死亡(ICD)通过释放损伤相关分子模式(DAMPs)激活免疫应答，成为突破方向。然而，天然化合物白藜芦醇(RES)虽能诱导内质网应激发挥抗癌作用，却因水溶性差、生物利用度低难以临床应用。

黑龙江中医药大学团队在《Colloids and Surfaces B: Biointerfaces》发表研究，通过迈克尔加成反应合成聚(β-氨基酯)-接枝-聚醚酰亚胺(PBAE-PEI, PP)载体，构建负载RES的pH敏感纳米颗粒(RPP NPs)。采用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、动态光散射(DLS)等技术表征材料特性，通过体外实验评估其对CT26细胞的ICD诱导效果及DCs成熟促进作用。

材料合成与表征
通过PBAE末端双键与PEI胺基的迈克尔加成反应成功制备PP载体。FT-IR显示3076 cm^-1
处PBAE的=C-H伸缩振动红移，PEI的N-H峰蓝移至1591 cm^-1
，证实化学键形成。RPP NPs粒径为162.3 nm，电位+28.6 mV，包封率82.3%，在pH 5.0时RES释放率达76.8%，体现pH响应性。

体外抗肿瘤效果
空白PP载体细胞毒性低于10%，而RPP NPs显著抑制CT26细胞增殖。溶酶体探针实验显示，RPP NPs在4h内完成溶酶体逃逸，促进RES快速释放。Western blot证实RPP NPs上调CRT、HMGB1等DAMPs表达，诱导内质网应激标志物GRP78和CHOP表达。

免疫激活机制
RPP NPs处理的CT26细胞上清液使DCs成熟标志物CD80/CD86表达提升2.1倍。Transwell实验显示该效应依赖于肿瘤细胞释放的可溶性因子，证实通过DAMPs-DCs轴激活抗肿瘤免疫。

结论与意义
该研究创新性地将天然化合物RES与纳米递送技术结合，证实RPP NPs可通过pH依赖性溶酶体逃逸和DAMPs释放双重机制诱导ICD。不仅解决了RES临床应用障碍，更揭示了纳米载体增强肿瘤免疫原性的新途径，为结肠癌免疫联合治疗提供了实验基础。研究获得黑龙江省自然科学基金(LH2021H098)等多项资助支持。