发现miR-106b-5p作为新型衰老细胞清除剂（senolytic miRNA）通过调控p53-PUMA轴延缓衰老相关炎症

本研究首次揭示miR-106b-5p作为senolytic miRNA可通过增强p53 K120乙酰化上调PUMA表达，选择性清除衰老细胞并抑制SASP。在自然衰老小鼠模型中，系统性递送该miRNA能显著降低多组织衰老标志物和血清IL-6水平，为衰老相关疾病治疗提供新策略。

　　

随着全球人口老龄化加剧，衰老相关疾病已成为重大公共卫生挑战。细胞衰老作为衰老的九大标志之一，其伴随的衰老相关分泌表型(SASP)会引发慢性炎症，导致组织功能障碍。虽然senolytic药物如达沙替尼+槲皮素(D+Q)组合已显示清除衰老细胞的潜力，但microRNA(miRNA)在衰老调控中的作用仍待深入探索。有趣的是，miR-106b-5p在长寿的Ames侏儒小鼠、生长激素缺乏(IGHD)人群和百岁老人中表达升高，但其在衰老调控中的具体机制尚不明确。

为解答这一科学问题，美国明尼苏达大学的研究团队在《eBioMedicine》发表重要成果。研究人员采用etoposide诱导的IMR90人肺成纤维细胞衰老模型、复制衰老的HUVEC内皮细胞以及95周龄自然衰老雄性小鼠，通过liposome介导的miRNA递送系统，结合SA-β-gal染色、Western blot、RNA-seq等技术，首次证实miR-106b-5p具有双重功能：既能选择性清除p21^CIP1
阳性衰老细胞（senolytic作用），又能抑制SASP因子表达（senomorphic作用）。

关键技术方法包括：1)建立etoposide诱导的IMR90细胞衰老模型和复制衰老的HUVEC模型；2)使用C₁₂
FDG荧光染色定量SA-β-gal阳性细胞；3)通过caspase 3/7活性和ATPase检测评估细胞凋亡；4)RNA-seq分析差异表达基因；5)在自然衰老小鼠模型中采用in vivo-jetPEI?递送miR-106b-5p模拟物。

【miR-106b-5p选择性靶向并清除衰老细胞】
研究发现50 nM miR-106b-5p处理96小时后，衰老IMR90细胞中SA-β-gal阳性细胞减少60%，同时显著下调p21^CIP1
和IL-6等SASP因子，但对非衰老细胞活力无影响。在HUVEC模型中观察到类似效果，证实其作用具有细胞类型普适性。

【miR-106b-5p通过诱导凋亡清除衰老细胞】
Caspase 3/7活性检测显示，miR-106b-5p以剂量依赖性方式促进衰老细胞凋亡。机制上，该miRNA显著上调促凋亡因子PUMA表达，同时降低自噬相关基因SQSTM1(p62)和组蛋白乙酰转移酶PCAF的表达，后者是调控p53乙酰化状态的关键因子。

【PUMA上调与p53 K120乙酰化的关键作用】
通过siRNA敲低实验证实PUMA是miR-106b-5p发挥senolytic效应的必要条件。Western blot显示该miRNA特异性增强p53在K120位点的乙酰化（促进凋亡），而不影响S15位点磷酸化（与细胞周期阻滞相关）。在非衰老细胞中，miR-106b-5p反而降低p53 K120乙酰化，解释其对正常细胞的保护作用。

【自然衰老模型中的治疗潜力】
在95周龄老年小鼠中，三次腹腔注射miR-106b-5p可使肝脏SA-β-gal阳性细胞减少42%，γ-H2AX焦点降低35%。多组织qPCR分析显示肝脏、肾脏中p16^INK4a
、IL-1β显著下调，血清IL-6水平呈下降趋势。RNA-seq证实SenMayo衰老基因集整体下调，炎症通路受抑制。

这项研究具有多重重要意义：首先，发现首个具有组织广谱性的miRNA类senolytic剂，为衰老干预提供新工具；其次，阐明通过精确调控p53乙酰化状态可改变细胞命运抉择（凋亡vs衰老）的新机制；最后，为解释长寿人群中miR-106b-5p高表达的现象提供分子基础。值得注意的是，该miRNA在肿瘤中通常作为致癌因子，但在衰老细胞中却通过独特机制发挥抑衰作用，这种"环境依赖性功能"为药物安全性评估提供新视角。未来研究需解决递送效率优化和性别差异等问题，但无疑为开发抗衰老疗法开辟了崭新路径。