中国南方HIV感染者中经典人类星状病毒（HAstV1）血清反应性显著升高：免疫缺陷人群的血清流行病学特征与临床意义

本研究通过表达经典（HAstV1）与新型（MLB2/VA1）人类星状病毒（HAstV）刺突蛋白，系统分析了中国南方HIV感染者与非感染者的血清反应性差异。发现HIV感染者对HAstV1的抗体反应（aOR=1.91, P=0.027）显著增强，而VA1反应性降低（P=0.026），揭示了HIV相关免疫失调对HAstV感染的差异化调控，为免疫缺陷人群的病毒监测提供了重要依据。

　　

ABSTRACT
人类星状病毒（HAstVs）包含经典（HAstV1-8）与新型（MLB/VA）分支，是免疫缺陷人群中日益重要的病原体。这项横断面研究通过重组表达HAstV1、MLB2和VA1刺突蛋白，结合AlphaFold2结构验证，对中国南方197例（101例HIV阳性）血清样本进行ELISA检测。结果显示HIV阳性组对HAstV1的血清反应性显著更高（中位OD₄₅₀
：0.93 vs 0.64, P=0.047），且高反应性几率增加91%（aOR=1.91）。相反，VA1在HIV阳性组反应性降低（P=0.026）。总体血清阳性率最高为VA1（78.68%），MLB2与VA1共暴露显著相关（aOR=1.60）。

INTRODUCTION
自1975年发现以来，HAstVs已成为胃肠炎的重要病原体，其7 kb基因组编码非结构蛋白（ORF1a/1b）和主要抗体靶点衣壳蛋白（ORF2）。新型MLB/VA分支的发现扩展了其疾病谱，尤其在免疫缺陷者中与脑炎相关。HIV感染导致的免疫功能障碍可能增加HAstV易感性，但相关血清流行病学数据匮乏。

RESULTS

1. 蛋白表达与验证
   通过大肠杆菌成功表达HAstV1/MLB2/VA1刺突蛋白（28.2-35.1 kDa），Western blot验证其纯度。AlphaFold2预测显示HAstV1/VA1与晶体结构高度吻合（RMSD<1 ?），MLB2与同源MLB1结构偏差较大（RMSD=2.075 ?）。

2. 小鼠模型验证特异性
   免疫小鼠血清仅对同源抗原产生强反应（HAstV1组OD₄₅₀
   =1.96），交叉反应检测证实三种抗原的ELISA特异性。

3. 人群血清学特征
   HIV阳性组HAstV1血清阳性率显著更高（82.18% vs 67.71%, P=0.029），且"超强阳性"比例达16.83%。MLB2与VA1共暴露存在显著关联（P=0.010），提示共同传播途径。

DISCUSSION
经典HAstV1在HIV感染者中的高反应性可能与免疫缺陷导致的持续感染有关，而新型HAstVs的广泛流行（VA1阳性率78.68%）反映了区域传播特性。研究局限性包括单中心设计和缺乏CD4⁺
T细胞数据，但结果为免疫缺陷人群的HAstV监测提供了关键基线。

MATERIALS AND METHODS
研究采用广州第八人民医院的血清样本，通过pET-28a载体表达His标签蛋白，Ni-NTA纯化后建立间接ELISA体系。统计学分析使用R软件，血清阳性阈值定义为GFP对照的P97.5百分位。

ACKNOWLEDGMENTS
感谢华盛顿大学David Wang团队提供的质粒支持。研究受国家自然科学基金（32270158）和深圳医学研究基金（B2302029）资助。