靶向PRDX6与GSTP1协同抑制：神经母细胞瘤分化治疗的新策略及其分子机制

（编辑推荐）本研究揭示MYCN通过直接调控抗氧化酶PRDX6和GSTP1维持神经母细胞瘤（NB）未分化状态，联合抑制二者可协同诱导氧化应激、脂滴（LD）积累及功能性神经元分化，其作用通路独立于临床现有维甲酸（RA）方案，为克服RA耐药提供新靶点。

　　

高表达抗氧化酶基因与不良预后及神经分化的关联

神经母细胞瘤（NB）作为儿童交感神经系统胚胎性肿瘤，其高危病例常伴随MYCN癌基因扩增。研究发现，MYCN驱动代谢重编程，上调包括硫氧还蛋白1（TXN）、谷胱甘肽S-转移酶Pi 1（GSTP1）、过氧化物酶2（PRDX2）和过氧化物酶6（PRDX6）在内的抗氧化酶表达，且高表达与患者生存率显著负相关。通过小分子抑制剂（如PRDX6抑制剂MJ33）处理NB细胞系，可诱导神经突生长、凋亡标志物cleaved PARP-1/caspase-3上调，并伴随MYCN水平下降，提示抗氧化系统抑制可触发分化与凋亡的双重效应。

PRDX6抑制诱导类RA分化表型但机制迥异

MJ33处理MYCN扩增（MNA）细胞系SK-N-BE(2)和非扩增（NMNA）细胞系SH-SY5Y后，神经分化标志物p75^NTR
、分泌粒蛋白II（SCG2）及微管蛋白β3（TUBB3）表达升高，形态学呈现神经元样突起。值得注意的是，MJ33诱导的分化伴随脂滴（LD）积累，而RA处理仅部分依赖此途径。敲低PRDX6的细胞同样显示LD积累与分化表型，且代谢分析表明LD形成与能量代谢无关，而是为神经突生长提供膜脂原料。

脂滴积累是PRDX6抑制诱导分化的关键环节

通过二酰基甘油酰基转移酶抑制剂（DGATi）阻断LD形成后，MJ33的分化效应被显著抑制，而RA诱导的分化不受影响。透射电镜与油红O染色证实，PRDX6抑制后LD数量与体积增加，且与神经元活性增强相关。这一发现揭示了PRDX6通过调控脂代谢影响NB细胞命运的新机制。

PRDX6与GSTP1在发育与肿瘤中的表达特征

单细胞RNA测序显示，小鼠胚胎肾上腺发育中，Prdx6与Gstp1在E12.5期Schwann细胞前体（SCPs）中与Mycn共表达，提示其在交感神经发育中的作用。NB患者数据分析表明，PRDX6在间质样（MES）肿瘤中高表达，而GSTP1在去甲肾上腺素能（NOR）群体中富集，二者联合高表达（High^PRDX6+GSTP1
）与未分化状态和不良预后显著相关。

MYCN直接调控PRDX6/GSTP1的分子证据

染色质免疫沉淀（ChIP）证实MYCN结合PRDX6启动子区E-box元件，且诱导性敲低MYCN可降低PRDX6蛋白水平。这一调控关系解释了为何MNA肿瘤中PRDX6/GSTP1始终高表达，为靶向干预提供理论依据。

双靶点抑制的协同效应与神经元功能激活

MJ33与GSTP1抑制剂EZ（ezatiostat）联用显示协同抗增殖作用，并显著增强ROS生成。双抑制剂处理后的细胞表现出更长的神经突、更高的SCG2/TUBB3表达，以及钙信号介导的神经元电活动，其成熟度超越RA处理组。蛋白组学分析揭示，联合治疗特异性激活CREB（S133磷酸化）及其下游靶点VGF神经生长因子、GDF15，而RA则富集视黄醇结合蛋白（RBP1）通路。

体内验证与临床转化潜力

SK-N-BE(2)异种移植模型中，MJ33+EZ联合治疗显著抑制肿瘤生长，病理切片显示Ki67降低、MYCN减少及神经标志物升高。值得注意的是，MJ33与临床化疗药物长春新碱（vincristine）或依托泊苷（etoposide）联用分别呈现协同与相加效应，为克服化疗耐药提供新思路。

讨论与展望

本研究阐明PRDX6-GSTP1轴通过维持氧化还原稳态阻碍NB分化，其抑制可触发CREB介导的神经元成熟程序，且与RA通路互不重叠。GSTP1抑制剂EZ（已获FDA孤儿药资格）的临床转化潜力，以及PRDX6在化疗增敏中的作用，为高危NB患者提供了差异化治疗策略。未来需探索双靶点抑制与RA序贯治疗的协同性，以及其在MES表型肿瘤中的适用性。